概述：

這種抗體與合成胸苷類似物BrdU反應(yīng)，當(dāng)將其注射到動物在細(xì)胞周期的S期被整合到新合成的DNA鏈中積極增殖的細(xì)胞。存活的細(xì)胞數(shù)量可以通過免疫細(xì)胞化學(xué)。作為評估一組細(xì)胞增殖狀態(tài)的杰出工具，它對藥物發(fā)現(xiàn)研究至關(guān)重要，尤其是在癌癥治療和在ADME/Tox研究期間確定細(xì)胞的健康狀況。BrdU Antibody-W是一種多克隆抗體在兔體內(nèi)針對結(jié)合牛血清白蛋白（BSA）的BrdU培養(yǎng)。Fluorochrome的抗體用于大鼠腦組織的免疫細(xì)胞化學(xué)。。

艾美捷 BrdU抗體（FC60001）的表征：

A.齒狀回BrdU陽性細(xì)胞（60X）成年大鼠注射BrdU。在共焦顯微鏡上拍攝的照片

B.齒狀回B.BrdU阻滯

BrdU抗體（FC60001）基本參數(shù)：

中文名稱：BrdU抗體

英文名字：BrdU Antibody -W

cat#：FC60001

規(guī)格：200ul

應(yīng)用類型：IHC

免疫原：BrdU結(jié)合牛血清白蛋白（BSA）

來源宿主：兔

反應(yīng)性：大鼠

保存建議：小瓶含有約200μl 1/100稀釋液。 BrdU抗體-W可在BSA稀釋劑（50 mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS）中進一步稀釋至至少1/30，000。n抗體應(yīng)在-20 ℃下儲存。 您將收到解凍的抗體。 除非你打算在48小時內(nèi)使用，否則請重新冷凍。 避免多次重新冷凍抗體。n還包括吸附BrdU的濾紙，用于阻塞。 可向試管中加入500μl稀釋抗體，以獲得10 μM的組織塊。 應(yīng)用于組織前，在室溫（RT）下孵育至少1小時。 該抗體特異性阻斷BrdU，不阻斷濾紙上吸附的其他肽。

通過進行阻斷研究確定了特異性。從將先前注射BrdU的成年大鼠的海馬與單獨使用BrdU Antibody-W（A-60X）或與BrdU預(yù)孵育的BrdU Antibody-W一起使用（B-60X）。注意A中的標(biāo)記和B中的標(biāo)記缺失，表明抗體的特異性舞臺調(diào)度。

BrdU抗體（FC60001）基本操作：

新鮮冷凍的10-30微米切片在室溫下固定在4%多聚甲醛（FA）中1小時，在磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）中洗滌，然后用50%甲酰胺/2X SSC（300mM氯化鈉和30mM檸檬酸鈉）在65C下攪拌2小時。切片按2X洗滌SSC，在37℃的2N HCL中孵育30分鐘，然后直接置于100mM鈉中硼酸鹽（pH 8.5）在室溫下10分鐘。將切片在PBS中洗滌0.3%H2O2在PBS中10至30分鐘。再次在PBS中洗滌組織，然后用Avidin/Biotin阻斷試劑盒（Vector cat#SP-2001），用BSA稀釋劑洗滌和孵育在室溫下持續(xù)1小時。在室溫下將BrdU Antibody-W（1/30000）應(yīng)用于組織過夜。之后在PBS中洗滌，將切片在生物素化GAR中以1/1000（Vector labs-cat#BA1000）在RT孵育1小時，然后在Avidin/Biotin中以1/10000（Vector labs-cat#PK6100）在RT溫育1小時（0.04%）在0.1M乙酸鈉中與0.06%H2O2混合六分鐘（2.5%氯化鎳也可以添加）。然后對切片進行水洗（如果需要，進行復(fù)染）、脫水和蓋子滑落。

文獻：

Garcia-Fuster et al, in preparation: Individual differences in adult hippocampal neurogensis following experimenter administration of cocaine.