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武漢艾美捷科技有限公司
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特點和基本操作丨艾美捷Fluorochrome Ki67抗體

時間:2023/2/7閱讀:186
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Ki67是正在進行的細胞增殖的內在標志物,存在于細胞周期的所有活性階段(G1-M)。這種抗體是多克隆的,在兔體內被培養成人肽序列TPKEKAQALEDLAGFKLFQT,該序列在注射到兔體內之前通過戊二醛與甲狀腺球蛋白偶聯。該抗體已用于大鼠和人腦組織的免疫細胞化學。

 

Fluorochrome Ki67抗體(FC40001)基參:

中文名稱:Ki67抗體

英文名字:Ki67 Antibody-W

規格:200ul

應用類型:IHC

免疫原:該抗體是多克隆抗體,在兔體內針對人肽序列TPKEKAQALEDLAGFKELFQT產生

來源宿主:兔

反應性:人,大鼠

保存建議:小瓶中含有約200微升1/100稀釋液。 抗體可在BSA稀釋液(50 mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS)中進一步稀釋至至少1/20,000。 抗體應在-20 ℃下儲存。 還包括吸附有用于封閉的特異性肽的濾紙。 可向管中加入500 μ l稀釋的抗體以獲得10 μ M阻斷。 應用于組織前,在室溫(RT)下孵育至少1小時。 抗體特異性地與該肽阻斷,而不與吸附在濾紙上的其他肽阻斷。

 

艾美捷Fluorochrome Ki67抗體(FC40001)特點:

各批次間結果一致且可重復

采用重組技術,可實現快速生產

經過大量驗證確認了特異性

不含動物成分

 

Fluorochrome Ki67抗體(FC40001)基本操作

新鮮冷凍的10-30微米切片在室溫下在4%多聚甲醛(FA)中固定1小時,在磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中洗滌,然后在90%的溫度下在10%檸檬酸鈉中處理40分鐘。將切片在檸檬酸鈉溶液中冷卻20分鐘,在PBS中洗滌,并用PBS中的0.1-0.3%H2O2孵育10至30分鐘。再次在PBS中洗滌組織,然后用Avidin/Biotin阻斷試劑盒(Vector cat#SP-2001)處理,在RT下洗滌并用BSA稀釋劑孵育1小時。在RT下將Ki67抗體(1/20000)施加到組織上過夜。在PBS洗滌后,將切片在生物素化GAR中以1/1000(Vector labs cat#BA1000)在RT下孵育1個小時,洗滌,然后在阿維丁/生物素(Avidin/Biotin)中以1/1000(Vector labs cat#PK6100)在室溫下孵育1小時。洗滌后,用二氨基聯苯胺(0.04%)在0.1M乙酸鈉中與0.06%H2O2混合六分鐘(也可以加入2.5%的氯化鎳)觀察信號。然后對切片進行水洗(如果需要,進行復染)、脫水并蓋上蓋子。

 

該抗體也適用于FluorochromeBRDU抗體可視化方案。可以使用4%FA灌注組織代替新鮮冷凍切片。

 

Ki67抗體(FC40001)出版物:

Perez et al, The Journal of Neuroscience, May 13, 2009:29(19):6379-6387

Garcia-Fuster et al, in preparation: Individual differences in adult hippocampal neurogensis following experimenter administration of cocaine.

 

艾美捷科技是Fluorochrome的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。


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