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武漢艾美捷科技有限公司
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Enzo蛋白聚集分析試劑盒——快速、特異性和定量標記

時間:2022/8/16閱讀:207
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聚集體是聚集的、錯誤折疊的蛋白質的包涵體,當泛素-蛋白酶體蛋白質降解機制不堪重負時形成。通常,聚集體響應細胞應激而形成,并通過分離錯誤折疊的蛋白質提供細胞保護機制,最終通過自噬清除它們。此外,蛋白質聚集體的形成是多種人類疾病的標志,例如阿爾茨海默氏癥、帕金森氏癥、肌萎丨縮側索硬化癥或酒精性肝病。

 

艾美捷 Enzo蛋白聚集分析試劑盒提供了一種快速、特異性和定量的方法來標記細胞中的聚集體,無需人工蛋白質突變。

 

艾美捷 Enzo蛋白聚集分析試劑盒包含的 PROTEOSTAT ® Aggresome 檢測試劑是一種分子轉子染料。在溶液中,沿單個中心鍵的自由分子內旋轉可防止熒光。PROTEOSTAT® _染料特異性地插入到通常存在于錯誤折疊和聚集的蛋白質中的四元蛋白質結構的交叉β脊柱中,這將抑制染料的旋轉并導致強烈的熒光。

 

艾美捷 Enzo蛋白聚集分析試劑盒特點:

1、提供基于細胞的藥物反應性測定,以在真實的細胞環境中鑒定與神經退行性疾病相關的抑制劑

2、可靠且簡單的測定不需要非生理性蛋白質突變或基因工程細胞系

3、在廣泛的條件下進行驗證,并使用小分子調節劑證明適用于篩選具有潛在治療價值的化合物

4、固定細胞檢測針對抗體共定位研究進行了優化

5、通過流式細胞術輕松量化聚集體和相關包涵體

6、可用于神經退行性疾病、肝病、毒理學研究等的研究

 

PROTEOSTAT ®染料已在各種條件下和小分子調節劑得到驗證,證明其適用于化合物篩選。此外,它適用于多重共免疫熒光,以在自噬和聚集體形成的背景下研究您感興趣的目標。


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圖:用試劑處理 K562 細胞以誘導 ER 應激和不*自噬,分別使用 Thapsigargin (Tg, 0.1 µM)2550 和 75 µM CQ處理 24 小時。使用蛋白酶體抑制劑 MG-132 (5 µM) 進行陽性對照 24 小時。沉淀的細胞被固定和透化。然后根據說明使用 300 µl PROTEOSTAT® Aggresome Detection 試劑(Enzo Life Sciences)和 1 µg/ml DAPI(用于細胞周期測定)在室溫下將細胞標記 30 分鐘。測定每種處理的 期 G1 以上和 G2m S 期以上的聚集傾向因子 (APF) 的相對增加,并與對照值進行比較。與對照組相比,ER 應激誘導劑、Tg 和 50 µM CQ 在 期比 G1 更能上調聚集體。


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