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武漢艾美捷科技有限公司
初級會(huì)員 | 第6年

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Cell Biolabs丨艾美捷 293細(xì)胞系解決方案

時(shí)間:2022/3/15閱讀:192
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293細(xì)胞系是從原代胚胎人類腎臟中建立的永丨久性細(xì)胞系人類腺病毒5型DNA。腺病毒E1區(qū)(E1a和E1b)編碼的基因是在這些細(xì)胞中表達(dá),并參與病毒啟動(dòng)子的反式激活,使這些細(xì)胞產(chǎn)生高水平的蛋白質(zhì)。E1還補(bǔ)充了重組腺病毒載體中的E1缺失,允許病毒復(fù)制。我們的293/Cas9細(xì)胞系穩(wěn)定表達(dá)Cas9和嘌呤霉素抗性基因。利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將Cas9和嘌呤霉素抗性基因?qū)胗H代293細(xì)胞。

 

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圖:293/Cas9細(xì)胞系表達(dá)Cas9蛋白。293個(gè)細(xì)胞或293/Cas9細(xì)胞用RIPA緩沖液,并使用Cell BiolabCas9 ELISA試劑盒(Cat#PRB-5079)檢測Cas9蛋白水平。

 

Cell Biolabs 艾美捷293細(xì)胞系培養(yǎng)方法:

從冷凍細(xì)胞建立293/Cas9培養(yǎng)基:

1.將10毫升完整的DMEM生長培養(yǎng)基放入50毫升錐形管中。解凍冷凍的食物在37°C水浴中輕輕攪拌,在1-2分鐘內(nèi)冷凍細(xì)胞。凈化空氣用70%(v/v)乙醇擦拭冷凍瓶表面。

2.將解凍的細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到含有10mL生長培養(yǎng)基的錐形管中。

3.在室溫下以1000 rpm的轉(zhuǎn)速離心5分鐘,收集細(xì)胞。移除通過抽吸培養(yǎng)基。

4.輕輕移液,將細(xì)胞重新放入錐形管中的15毫升新鮮生長培養(yǎng)基中然后倒下。

5.將15毫升細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到T-75組織培養(yǎng)瓶中。將電池置于37°C的環(huán)境中培養(yǎng)箱中的二氧化碳濃度為5%。

6.每天監(jiān)測細(xì)胞密度。細(xì)胞應(yīng)在培養(yǎng)物達(dá)到95%匯合時(shí)傳代。

 

Cell Biolabs:細(xì)胞學(xué)試劑品牌,為生物技術(shù)和研究類客戶提供基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的技術(shù)和服務(wù)。主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。

 

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Cell Biolabs 相關(guān)研究方案:

1.CBA-100:細(xì)胞選擇™ 24孔細(xì)胞遷移試驗(yàn)(波頓室試驗(yàn),比色法)

2.CBA-106:細(xì)胞選擇™ 96孔細(xì)胞遷移試驗(yàn)(Boyden小室試驗(yàn),熒光法)

3.CBA-110:細(xì)胞選擇™ 24孔細(xì)胞侵襲試驗(yàn)(波頓室試驗(yàn),比色法)

4.CBA-120:細(xì)胞選擇™ 24孔傷口愈合試驗(yàn)

 

艾美捷科技是Cell Biolabs的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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