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細胞凋亡檢測研究:Annexin V如何解決?

時間:2022/2/19閱讀:178
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在生物學研究過程中常常需要檢測細胞凋亡情況。目前至少有十數(shù)種檢測細胞凋亡的方法,大致可分為基于細胞形態(tài)、生物學功能和生化標記三大類。那接下來就來說一下Annexin V-細胞凋亡檢測方法。

 

Annexin V凋亡檢測原理:

 

當細胞發(fā)生凋亡時,會首先出現(xiàn)細胞膜結構的改變。其中在正常情況下,細胞膜中磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)通常存在于內表面,而在細胞發(fā)生凋亡的過程中,PS會外翻、轉移到質膜的外層。因此可以通過該現(xiàn)象,利用檢測磷脂酰絲氨酸的方法,檢驗細胞是否發(fā)生凋亡。

 

Annexin V是膜聯(lián)蛋白的一種,其功能目前尚不明確,但Annexin V已知可在鈣離子存在的情況下與磷脂酰絲氨酸高親和力結合。利用該特點,使用熒光或其他偶聯(lián)標記標記的Annexin V即可檢測細胞膜表面暴露的PS

 

由于細胞在晚期凋亡或死亡后細胞膜結構破壞,此時Annexin V可以隨意進出細胞,染色呈陽性,這就造成與我們關注的早期凋亡事件無法區(qū)分。而在細胞早期凋亡時,細胞膜完整性尚未破壞,此時非浸透性熒光染料如7-AADPI無法進入細胞,染色呈陰性。因此結合Annexin V7-AAD/PI染色,經(jīng)流式細胞儀和熒光顯微鏡檢測,即可區(qū)分早期凋亡和晚期凋亡/死亡細胞。

 

艾美捷/Annexin V 是一種磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,它通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合,是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。


11.png

 

艾美捷/Annexin V組成成分:

637808009272184806833.png

 

以上,就是有關艾美捷/Annexin V-細胞凋亡檢測的相關解決方案了。


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