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熒光染料研究:PerCP-Cy5.5串聯染料方案

時間:2021/8/10閱讀:2337
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常見流式抗體熒光染料介紹

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1) 藻紅蛋白(phycoerythrinPE):PE是從紅藻中分離純化獲得的一種常見染料,經激光激發后發出橙黃色熒光,zui大發射波長為575 nmPE具有吸光性能好和光量子產率高的特點,可用于標記表達水平較低的蛋白。在流式細胞術檢測中,PE標記的抗體適用于所有配備488 nm氬離子激光器的流式細胞儀。

 

2) PE-Cy5:PE-Cy5是一種復合染料,屬于藻紅蛋白偶聯物,在此類復合染料中,激發能量可從PE傳遞到Cy5上,zui大發射波長為667 nm。由于PE-Cy5FITCPE在光譜上重疊范圍較少,熒光干擾少,因此實驗中常將PE-Cy5FITCPE搭配使用。需注意,PE-Cy5不適合與APC搭配使用,兩者熒光重疊大。

 

3)PE-Cy5.5:PE-Cy5.5也是一種復合染料,能量從PE傳遞到Cy5.5上,zui大發射波長為694 nm。同PE-Cy5不一樣,PE-Cy5.5FITCPEAPC間熒光干擾小,可搭配使用,且其熒光強度要優于PE-Cy5

 

4) PE-Cy7:復合染料,zui大發射波長為785 nmPE-Cy7FITC無光譜重疊,與APC重疊也較少,因此其可與FITCPEAPC搭配使用。在實驗中需要注意,PE-Cy7的光淬滅性很強,需要避光環境。

 

5) PerCP-Cy5.5:復合染料,zui大發射波長為695 nm。PerCP-Cy5.5光量子產率高,可用于表達水平較低物質的檢測,與PerCP-Cy5.5相反,PerCP的光量子產率較低,適用于表達水平較高物質的檢測,在雙激光管儀器上與APC共同檢測時,需要做補償調節,但比PerCP補償少。

 

6) PI/7-AAD:碘化丙啶(propidium iodidePI)和7-AAD7-amino-actinomycin D)的zui大發射波長分別為617 nm647 nm,是常見的熒光染料,常用于細胞凋亡檢測,可用于鑒別死、活細胞。在大部分流式細胞儀上,PIFL2FL3通道檢測,7-AADFL3通道檢測。7-AADPI 有著相似的熒光特性,但其發射波譜較PI窄,對其他檢測通道的干擾更小,在多色熒光分析中是PI 替代品。

 

7) 別藻青蛋白(allophycocyaninAPC):APCzui大發射波長為660 nm,其標記的抗體適用于所有配備氦氖激光器的流式細胞儀,檢測通道一般是FL4通道。FITCPEAPC搭配是經典3色搭配。

 

8) Cy5:Cy5屬于小分子染料,其zui大發射波長為670 nm,其標記的抗體適用于所有配備633 nm氬離子激光器的流式細胞儀,檢測通道一般是FL4通道。除流式細胞術外,Cy5同樣適用于傳統的熒光顯微鏡技術。需注意的是,Cy5與單核細胞和粒細胞的非特異性結合多,實驗結果容易出現假陽性。

 

9) 異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC):FITC是應用 廣泛的一種熒光素,經激光激發后發出明亮的黃綠色熒光,zui大發射波長為525 nmFITC的熒光強度受PH影響較大,常隨著PH的降低而減弱,因此,在使用FITC時需格外注意溶液的酸堿度。

 

PerCP-Cy5.5串聯染料相關研究工具:

 

名稱

Cat#

規格

PE [R-Phycoerythrin]

2556

10mg

PE-Cy5 Tandem

2610

1mg

PE-Cy5.5 Tandem

2613

1mg

PE-Cy7 Tandem

2616

1mg

PE-Cy5.5 Tandem蛋白/抗體標記試劑盒

1316/1341

2 Labelings

APC [Allophycocyanin]

2554

1mg

APC-Cy5.5 Tandem

2622

1mg

APC-Cy7 Tandem

2625

1mg

PerCP-Cy5.5 Tandem

2650

1mg

APC-Cy5.5 Tandem 蛋白/抗體標記試劑盒

1320

2 Lalelings

 

美國AAT Bioquest Inc.是一家為從事生命科學研究、診斷研發及藥物開發的科學家研發、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域,包括吸收(顏色),熒光和發光技術。艾美捷科技是AAT的中國代理商,為您提供優質的PerCP-Cy5.5串聯染料。



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