Bio-Rad 1658033 小型垂直電泳轉(zhuǎn)印系統(tǒng)用戶指南

——精準(zhǔn)蛋白與核酸分析的一體化解決方案

一、系統(tǒng)概述

Bio-Rad 1658033 是專為實驗室小型化研究設(shè)計的垂直電泳轉(zhuǎn)印系統(tǒng)，集成 Mini-PROTEAN® Tetra 電泳槽（1658001）、PowerPac Basic 基礎(chǔ)電源（1645050） 和 Mini Trans-Blot® 轉(zhuǎn)印模塊（1703935），可實現(xiàn) 蛋白質(zhì)分離（SDS-PAGE/Native PAGE）、核酸電泳 及 Western Blot 轉(zhuǎn)印 全流程操作。系統(tǒng)采用緊湊設(shè)計，兼容預(yù)制膠與手工灌膠，適用于蛋白純度鑒定、分子量測定及下游分析。

二、核心組件與技術(shù)參數(shù)

三、系統(tǒng)優(yōu)勢

1. 高效分離與轉(zhuǎn)印

• 1 小時內(nèi)完成 4 塊凝膠電泳，支持 SDS-PAGE 和 Native PAGE 多種模式。

• Mini Trans-Blot® 模塊 配備 Bio-Ice 冷卻裝置，確保轉(zhuǎn)印過程中溫度穩(wěn)定，減少蛋白降解。

2. 靈活兼容性

• 支持 Bio-Rad 預(yù)制膠（如 Mini-PROTEAN® TGX）與手工灌膠，適配實驗室不同需求。

• 平行排列的灌膠架可同時制備兩塊凝膠，彈簧杠桿設(shè)計保證密封性。

3. 用戶友好設(shè)計

• 透明電泳槽便于實時觀察實驗進程，防漏設(shè)計避免緩沖液泄漏。

• 模塊化組件易于拆卸清洗，降低維護成本。

四、操作流程

（一）電泳操作

1. 凝膠制備

• 選擇合適厚度的玻璃板（10.1 × 7.3 cm 或 10.1 × 8.2 cm），使用制膠夾固定。

• 注入分離膠與濃縮膠，插入梳子（孔寬 3.35–12.70 mm），室溫聚合 30 分鐘。

2. 樣品上樣

• 拔除梳子，用移液器加入 10–20 μL 樣品（如蛋白 Marker、蛋白樣品）。

• 加入電泳緩沖液至刻度線，蓋上電泳槽蓋。

3. 電泳運行

• 設(shè)置電源參數(shù)（如 120 V 恒壓，30–60 分鐘），啟動電泳。

• 溴酚藍遷移至凝膠底部時停止電泳。

（二）轉(zhuǎn)印操作

1. 凝膠處理

• 電泳結(jié)束后，取出凝膠，切除濃縮膠，保留分離膠。

• 將凝膠浸泡于轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡 10 分鐘。

2. 轉(zhuǎn)印夾組裝

• 按順序放置海綿墊、濾紙、凝膠、PVDF 膜（預(yù)濕）、濾紙、海綿墊，形成“三明治"結(jié)構(gòu)。

• 插入轉(zhuǎn)印夾，紅色電極對應(yīng)正極，黑色電極對應(yīng)負(fù)極。

3. 轉(zhuǎn)印運行

• 設(shè)置轉(zhuǎn)印參數(shù)（如 300 mA 恒流，60 分鐘），啟動轉(zhuǎn)印。

• 轉(zhuǎn)印結(jié)束后，取出 PVDF 膜，進行封閉與抗體孵育。

五、應(yīng)用場景

1. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究

• 分離復(fù)雜蛋白混合物，分析蛋白表達差異（如 Western Blot 驗證）。

2. 分子生物學(xué)實驗

• 檢測 DNA 片段大小（瓊脂糖凝膠電泳）、PCR 產(chǎn)物純化。

3. 藥物研發(fā)

• 評估蛋白純度與活性，支持抗體藥物開發(fā)。

4. 教學(xué)實驗

• 適用于高校生物化學(xué)與分子生物學(xué)課程，幫助學(xué)生掌握電泳與轉(zhuǎn)印技術(shù)。

六、維護與注意事項

1. 日常維護

• 電泳槽與緩沖液槽可單獨拆卸，使用超純水清洗，避免殘留鹽結(jié)晶。

• 定期檢查電源線與電極絲，確保導(dǎo)電性良好。

2. 安全規(guī)范

• 操作時佩戴手套，避免緩沖液接觸皮膚與眼睛。

• 禁止空載運行電源，防止過熱損壞。

3. 故障排查

• 電泳速度異常：檢查緩沖液濃度與電壓設(shè)置。

• 轉(zhuǎn)印效率低：確認(rèn)轉(zhuǎn)印膜與凝膠接觸緊密，調(diào)整轉(zhuǎn)印時間與電流。