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分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發生了電子能躍遷而產生的吸收光譜。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其有的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些征波長處的吸光度的低判別或測定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息。可以用標準光圖譜再結合其它手段行定性分析。
根據Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比;如果同時考慮吸收層厚度和溶液濃度對光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對溶液行定量分析。
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同溶劑中，在同條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同物質，則兩者的光譜圖應致。如果沒有標樣，也可以和現成的標準譜圖對照行。這種方法要求儀器準確，度，且測定條件要相同。
實驗證明，不同的性溶劑產生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪種溶劑。
在水和廢水監測中的應用，對于個水系的監測分析和綜合評價，般包括水相(溶液本身)、固相(懸浮物、底質)、生物相(水生生物)。在水質的常規監測中，紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復雜多變，待測物的濃度和干擾物的濃度差別很大，在具體分析時選擇好分析方法。
在農產品和食品分析中可用于檢測的組分或成分有蛋白質、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于檢測葉綠素、氮和酶的活力等;
在飼料分析中可用于檢測煙酸、棉酚、磷化氫和甲酯等。
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