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制備型蒸發光散射檢測器的“霧化-蒸發-檢測”三步驟

閱讀:6997        發布時間:2018/6/24
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   制備型蒸發光散射檢測器的“霧化-蒸發-檢測”三步驟
  制備型蒸發光散射檢測器消除了常見于其他HPLC檢測器的問題。示差檢測受溶劑前沿峰的干擾使得分析復雜化,并且由于對溫度極其敏感使得基線很不穩定,與梯度洗脫不相容。另外,示差檢測器的響應不如ELSD靈敏。而低波長紫外檢測器在急變梯度條件下受基線漂移的困擾,并要求被分析化合物帶有發色團。ELSD則不受這些限制。不同于這些檢測器,ELSD能在多溶劑梯度的情況下獲得穩定的基線,使得分辨率更好、分離速度更快。另外,因為ELSD的響應不依賴于樣品的光學特性,所以ELSD檢測時樣品不要求帶有發色團或熒光基團。
  1.霧化
  經HPLC分離的柱洗脫液進入霧化器,在此與穩定的霧化氣體(一般為氮氣)混合形成氣溶膠。氣溶膠由均勻分布的液滴組成,液滴大小取決于分析中采用的氣體流量。氣體流量越低形成的液滴越大,液滴越大則散射的光越多,從而提高了分析靈敏度,但是越大的液滴在漂移管中越難蒸發。每種方法均存在產生佳信號噪音比率的優化氣體流量。流動相流速越低要求適當霧化的氣體流量也越低。用內徑為2.1mm的微徑柱代替內徑為4.6mm標準型分析柱,能大大降低流動相流速,因而提高分析的靈敏度。
  2.蒸發
  氣溶膠中揮發性成分在加熱的不銹鋼漂移管中蒸發。為特定應用設置適當的漂移管溫度,取決于流動相組成和流速,以及樣品的揮發性。高有機含量流動相比高含水量流動相要求蒸發的漂移管溫度低。流動相流速越低比流動相流速越高要求蒸發的漂移管溫度越低。半揮發性樣品要求采用較低的漂移管溫度,以獲得佳靈敏度。佳溫度需要通過觀察各溫度時的信號噪音比率來確定。
  3.檢測
  懸浮于流動相蒸汽中的樣品顆粒從漂移管進入到光散射檢測池。在檢測池中,樣品顆粒散射激光光源發出的光而蒸發的流動相不散射。散射光被硅光電二極管檢測,產生電信號輸送模擬信號輸出端口,被用于模擬輸出的數據采集。

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