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RSC96-RSC96 大鼠雪旺細胞/鏡像綺點(iCell)
  • RSC96-RSC96 大鼠雪旺細胞/鏡像綺點(iCell)
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貨物所在地:上海上海市

地: 上海市徐匯區聚科生物園銀都路4

更新時間:2025-06-23 09:38:11

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RSC96 大鼠雪旺細胞/鏡像綺點(iCell)
RSC96 大鼠雪旺細胞介紹
RSC96細胞株是原代培養的大鼠雪旺細胞經長時間培養后自發轉化而成的[PubMed: 9766530]。 2002年十二月提交到ATCC的培養物污染了支原體。 其后代通過BM 細胞周期蛋白處理21天消除支原體。 處理后六周,用Hoechst染色、PCR和標準培養測試進行支原體檢測, 結果都呈陰性。

RSC96 大鼠雪旺細胞/鏡像綺點(iCell)介紹

RSC96細胞株是原代培養的大鼠雪旺細胞經長時間培養后自發轉化而成的[PubMed: 9766530]。 2002年十二月提交到ATCC的培養物污染了支原體。 其后代通過BM 細胞周期蛋白處理21天消除支原體。 處理后六周,用Hoechst染色、PCR和標準培養測試進行支原體檢測。 結果都呈陰性。 在本庫通過支原體檢測。

細胞特性

來源:大鼠雪旺細胞

形態:神經元

1) 含量:>1x106 個/mL

2) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

3) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

 

RSC96 大鼠雪旺細胞/鏡像綺點(iCell)用途:僅供科研使用。

細胞接收后的處理:

1) 收到細胞后,請檢查發貨培養瓶的狀況,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X和20×物鏡下,同時給細胞拍照各2-3張(10×,20×都要拍照),作為售后的依據。

3) 觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。

4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象,如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。

5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基)。

備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。  收到細胞后*次傳代建議1:2傳代 。

               

細胞培養步驟

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM(推薦iCell-0001),培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%;

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為例;

1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

培養細胞時請注意
(1)傳代時細胞的接種密度應控制在 1萬-4萬 活細胞/平方厘米。
(2)選用高質量的胎牛血清配制培養液。

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:

        一、原代細胞服務:
               各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
               多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
               原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等
               原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務

        二、細胞系服務:
               細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書
               細胞系培養過程的技術指導
               細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等

        三、iPS細胞服務:
               iPS細胞基礎培養(有滋養層or無滋養層)
               iPS細胞增殖及冷凍保存
               iPS基礎培養技術實習
               新藥及實驗儀器上市前評估

        四、其他技術外包服務、客戶定制服務等

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司

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