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如何培養小鼠小膠質BV2細胞?

閱讀:1077      發布時間:2024-11-17
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  培養小鼠小膠質BV2細胞需要遵循一系列特定的步驟和注意事項,以確保細胞的健康生長和實驗的準確性。以下是培養BV2細胞的一般步驟:
  
  一、準備階段
  
  1、培養基準備:使用DMEM高糖培養基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-鏈霉素(P/S)。
  
  2、環境控制:確保培養箱內的空氣占95%,二氧化碳濃度為5%,溫度保持在37℃。
  
  二、復蘇階段
  
  1、提前將水浴鍋預熱至37℃,培養基復溫至室溫或37℃,離心機設置好轉速。
  
  2、從液氮罐中取出細胞,迅速搖晃直至融化至米粒大小冰塊時終止水浴,整個過程不超過2分鐘。
  
  3、直接將凍存管以離心力150g(約900rpm)左右離心2分鐘,棄上清,用預熱的培養基緩慢加入凍存管,輕柔重懸細胞后接種至培養瓶中。
  

小鼠小膠質BV2細胞

 

  三、傳代階段
  
  1、輕輕吸走培養上清,留2-3mL培養基輕輕吹打細胞面吹下細胞。
  
  2、將細胞懸液轉移至離心管,900rpm離心3-5分鐘,棄上清。
  
  3、加新的全培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里,補足全培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養。
  
  四、凍存階段
  
  1、配制程序性凍存液,推薦配方為92%FBS+8%DMSO或92%全培養基+8%DMSO。
  
  2、先將細胞按傳代步驟獲得細胞沉淀,加入適量程序性凍存液輕輕重懸細胞,并將細胞懸液轉移至凍存管中。
  
  3、將凍存管放入程序性凍存盒,放入-80℃冰箱過夜,然后轉移至液氮保存并登記細胞保存位置。
  
  總之,培養小鼠小膠質BV2細胞需要嚴格控制培養條件、及時處理細胞狀態變化,并遵循規范的操作流程。通過這些措施,可以確保BV2細胞的健康生長和實驗的順利進行。

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