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放置指示劑：將 BT20 生物指示劑放置在滅菌物品內部最難滅菌的部位。對于包裹類物品，可以將指示劑放在包裹的中心位置；對于多孔的物品，如織物等，要確保指示劑被包裹在其中，避免直接接觸滅菌介質而導致結果不準確。例如，在滅菌一摞手術器械時，可以將生物指示劑放在器械中間的縫隙中。

進行滅菌操作：按照滅菌設備的操作說明書設定合適的滅菌參數（如溫度、壓力、時間等），然后啟動滅菌程序。對于高壓蒸汽滅菌，通常溫度設定在 121℃ - 134℃，壓力在 103 - 206kPa，時間根據滅菌物品的情況在 15 - 30 分鐘不等。

滅菌后處理：滅菌程序完成后，等待滅菌設備內的壓力和溫度自然下降到安全范圍，然后取出生物指示劑。在取出過程中，要注意避免指示劑受到污染，不要用手直接觸摸可能接觸芽孢的部分。

培養與結果判定：將取出的 BT20 生物指示劑放入專用的芽孢培養箱中進行培養。培養溫度一般為 56℃ - 60℃，培養時間通常為 24 - 48 小時。如果在培養后，指示劑顏色不變（如仍為紫色），表明滅菌徹di，芽孢全部被殺死；如果指示劑顏色發生變化（如變為黃色），則提示滅菌不徹di，有芽孢存活，需要對滅菌過程進行檢查和重新滅菌。