詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
HUHS015 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
HUHS015在體內體外都是PCA-1/ALKBH3強有力的抑制劑,持續的注射HUHS015能夠顯著的抑制DU145細胞的生長。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1453097-13-6 純度:99.77% 分子量:318.37 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
維羅納假單胞菌Bacillus thuringiensis雞層連蛋白/板層(LN)
孟氏假單胞菌Bacillus thuringiensis雞17-類固(17-KS)
單核增生李斯特氏菌Bacillus thuringiensis雞17-類固(17-KS)
尖孢鐮刀菌Bacillus thuringiensis雞N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)
大腸桿菌Bacillus thuringiensis雞N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)
黃直絲鏈霉菌Bacillus thuringiensis雞神經膠質纖維性蛋白(GFAP)
木賊鐮刀菌Bacillus thuringiensis雞神經膠質纖維性蛋白(GFAP)
海洋桿菌Bacillus thuringiensis雞白介17(IL-17)
維也納原小單孢菌Bacillus thuringiensis雞白介17(IL-17)
干酪乳桿菌假植物亞種Bacillus thuringiensis雞1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)
抱川芽孢桿菌Bacillus thuringiensis雞1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)
灰略紅鏈霉菌Bacillus thuringiensis雞可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)
木霉菌Bacillus thuringiensis雞可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)
稀疏鏈霉菌Bacillus thuringiensis禽腦脊髓炎(AE)
植物乳桿菌Bacillus thuringiensis禽腦脊髓炎(AE)
洲馬瘟?。?/span>VII型)Bacillus thuringiensis鴨白介8(IL-8/CXCL8)
造血細胞磷抗體長柄鏈格孢(煙草赤星病菌)假長雙歧桿菌
蛋白酪磷2抗體磚紅鐮孢明亮發光桿菌
細胞S期激相關蛋白2抗體變幻青霉產乙糖發酵菌
Smad4抗體束狀刺盤孢(束狀)路氏乳桿菌
PCA-1/ALKBH3抑制劑(HUHS015)SMYD3 英文名稱: 組蛋白甲基轉移酶SMYD3抗體 0.2ml
phospho-Ephrin B (Tyr324 + Tyr29) 英文名稱: 磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
炎癥負調控因子蛋白抗體 Anti-Tanis/SELS 0.2ml
Anti-TIF1 Alpha/TRIM24/FITC 熒光素標記轉錄中介因子Tif1α抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-LRP1(Ser4523) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關蛋白1抗體 規格 0.1ml
Batroxobin 蛇***毒***巴***曲***酶***抗***原Multi-class antibodies規格: 0.5mg