5-HT2A反向激動劑(Nelotanserin)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-FLT3 (Tyr969) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 表皮生長因子受體3(抗原)Multi-cla

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

綠色木霉（暫時不提供）Bacillus thuringiensis雞血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)

葡萄座腔菌Bacillus thuringiensis雞免疫球蛋白G(IgG)

紫色桿菌Bacillus thuringiensis雞免疫球蛋白G(IgG)

馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Bacillus thuringiensis雞堿性成纖維生長因子(bFGF)

小單孢菌Bacillus thuringiensis雞堿性成纖維生長因子(bFGF)

寄生曲霉Bacillus thuringiensis雞可溶性間粘附分子1(sICAM-1)

類芽胞桿菌Bacillus thuringiensis雞可溶性間粘附分子1(sICAM-1)

面包乳桿菌Bacillus thuringiensis雞可溶性E選擇(sE-selectin)

鴨疫里氏桿菌Bacillus thuringiensis雞可溶性E選擇(sE-selectin)

粉紅單端孢Bacillus thuringiensis雞表皮生長因子(EGF)

寡發(fā)酵鏈球菌Bacillus thuringiensis雞表皮生長因子(EGF)

*花椒褐斑病Bacillus thuringiensis雞胰島樣生長因子1(IGF-1)

栗疫菌Bacillus thuringiensis雞胰島樣生長因子1(IGF-1)

暗孢節(jié)菱孢Bacillus thuringiensis雞生長激(GH)

棗葉枯橄欖色盾殼霉Bacillus thuringiensis雞生長激(GH)

雷夫松氏菌Bacillus thuringiensis雞乙酰乙檢測(ACAC)

垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因抗體海生嗜鹽球菌鏈球菌(不定種)

視黃激活基因8抗體嗜堿假單胞傳染性支氣管炎病毒

雌激調(diào)節(jié)蛋白LIV1/鋅轉(zhuǎn)運蛋白抗體谷棒狀桿菌禽腦脊髓炎病毒

Shh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體嗜熱脂肪芽胞桿菌大腸埃希菌
5-HT2A反向激動劑(Nelotanserin)Styk1 英文名稱： 絲酸/蘇酸/酪酸激酶STYK1抗體 0.2ml

Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167) 英文名稱： 磷酸化雌激素受體ER alpha 抗體 0.1ml

src原癌基因抗體 Anti-SRC 0.2ml

Anti-Tie2/FITC 熒光素標(biāo)記上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP4(Ser1046) 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml

ATF6(activating transcription factor 6) 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg