產(chǎn)品屬性:
中文名稱:IMPDH抑制劑(AVN-944)
英文名稱:AVN-944
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
AVN-944(VX-944)是選擇性非競爭性IMPDH抑制劑,對IMPDH1和IMPDH2的Ki值為6-10nMIMPDH。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:297730-17-7 別名:VX-944 純度:99.91% 分子量:477.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
葡枝根霉Escherichia coli大鼠視黃結(jié)合蛋白(RBP)
棒狀雙歧桿菌Escherichia coli大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)
枝狀枝孢菌Escherichia coli大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)
芽孢桿菌Escherichia coli大鼠血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)
枯草芽孢桿菌Escherichia coli大鼠血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)
變異棒桿菌Escherichia coli大鼠主要堿性蛋白(MBP)
木霉屬Escherichia coli大鼠主要堿性蛋白(MBP)
萬壽菊黃色桿菌Escherichia coli大鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)
局限青霉Escherichia coli大鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)
盤長孢狀盤孢Escherichia coli大鼠鈣調(diào)磷(CaN)
蘑菇Escherichia coli大鼠鈣調(diào)磷(CaN)
皺褶青霉Escherichia coli大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)
褐平臍蠕孢Escherichia coli大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)
嗜幾丁質(zhì)芽孢桿菌Escherichia coli大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)
魯?shù)劓溍咕?/span>Escherichia coli大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)
黃綠木霉Escherichia coli大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)
蛋白體復(fù)合物C5抗體小孔異擔子菌花鼠皮膚成纖維樣細胞
磷脂A2激活蛋白抗體光核纖孔菌花鼠腎上皮樣細胞
胸苷磷化抗體齒白木層孔菌銀星竹鼠皮膚成纖維樣細胞
早老蛋白-2抗體擬緣小孔菌姬鼠皮膚細胞
IMPDH抑制劑(AVN-944)淺灰鏈霉 L-蛋(甲硫)
香魚假單胞 DL-蛋(甲硫)
枯草芽孢桿 醋酸辛酯
冬蟲夏草(冬蟲夏草,蝙蝠蛾被毛孢,中華被毛孢) 蟲草
東方伊薩酵母 補骨脂二氫黃酮甲
芽孢桿屬 補骨脂二氫黃酮
墻支頂孢 補骨脂定
毛霉 表兒茶
蘋果輪紋 表白樺脂酸
洋蔥伯克霍爾德 L-苯
光帽鱗傘(滑菇) D-半乳糖
β-
江西盤孢 L-
無殼曲霉 γ-氨基丁酸
葡萄白腐 1,8-桉葉
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)