VEGFR2和PDGFR抑制劑(TAK-593)公司正在出售的產(chǎn)品：Wnt2B/FITC 熒光標(biāo)記信號通路Wnt2B抗體IgG
Wnt3a/FITC 熒光標(biāo)記信號通路Wnt3a抗體IgG
WNT5A/FITC 熒光標(biāo)記信號通路Wnt5a抗體IgG
WNT9A/WNT14/FITC 熒光標(biāo)記信號通路Wnt9a抗體IgG
WNT10A/FITC 熒光標(biāo)記信號通路WNT10A抗體IgG
WRC

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

淡紫擬青霉Bacillus sp.大鼠骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)

模擬乳粉克羅諾桿菌質(zhì)控樣品（定性） Bacillus sp.大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)

平滑假絲酵母Bacillus sp.大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)

地中海新殼梭孢Halobacillus sp.大鼠促甲狀腺(TSH)

靈芝Bacillus sp.大鼠促甲狀腺(TSH)

擬盤多毛屬Bacillus sp.大鼠皮質(zhì)(Cortisol)

扣囊復(fù)膜孢酵母Bacillus sp.大鼠皮質(zhì)(Cortisol)

蔬菜芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠雌二(E2)

小鏈桿菌屬Bacillus sp.大鼠雌二(E2)

海濱鹽紅菌Bacillus sp.大鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)

落花生短胖孢Bacillus sp.大鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)

亮白曲霉Bacillus sp.大鼠睪(T)

杰丁塞伯林德納氏酵母Bacillus sp.大鼠睪(T)

枯草芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠游離睪(F-TESTO)

巨大芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠游離睪(F-TESTO)

Sphingomonas adhaesiva Bacillus sp.大鼠雄烯二(ASD)

T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)蛋白1抗體木糖氧化產(chǎn)堿桿菌暗灰色馬杜放線菌

色相關(guān)蛋白3抗體沙地芽孢桿菌棒狀鏈霉菌

胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成-1抗體解酪蛋白巨大球菌北里孢菌屬

組織因子抗體遲鈍愛得華氏菌草色串孢
VEGFR2和PDGFR抑制劑(TAK-593)釀酒酵母 對葉百部堿

釀酒酵母 紫云英苷

釀酒酵母 葒草苷

孢淡灰鏈霉 野百合堿

球孢枝孢 桔梗皂苷D

綠色木霉 吉馬酮

球孢白僵 異鉤藤堿

蝙蝠蛾擬青霉 透析夾

枯草芽孢桿枯草亞種 透析夾

香菇 鉤藤堿

假單胞 馬錢苷

三色青霉 蝙蝠葛堿

大腸埃希氏(大腸桿)* 透析夾

普通高溫放線 濱蒿內(nèi)酯

豬瘟陰、陽性血清國家參考品 (R型)人參皂苷Rh1