公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RSK抑制劑(LJH685)
英文名稱:LJH685
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
LJH685是一種有效的選擇性RSK抑制劑,抑制RSK1/2/3生物活性,IC50為4到13nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1627710-50-2 分子量:381.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
腸沙門氏菌浩敦亞種人雄激結(jié)合蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)
黃色孢鏈霉菌人抗滋養(yǎng)膜抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠雌二受體(ER)
香菇(Cr62)人抗透明帶抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠雌二受體(ER)
雪葉擬盤多毛孢人抗卵巢抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠半乳糖6硫酯(Gal-6S)
豬丹絲菌人抗巨病抗體IgGBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠半乳糖6硫酯(Gal-6S)
普通變形菌人堿性胎兒蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)
馬沙門氏菌陽性血清人抗風疹病IgM抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)
淺絳紅鏈霉菌人催產(chǎn)Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠(LPA)
地衣芽孢桿菌人相關(guān)血漿蛋白ABacillus subtilis subsp. subtilis小鼠(LPA)
雞傷寒沙門氏菌人抗內(nèi)膜抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)
拜氏不動桿菌人抗抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)
韓國游動微菌人皰疹抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)
無花果曲霉人胎盤生長因子Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)
楊樹莖點霉人凝血Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)
柯柯鹽湖枝芽孢桿菌人ⅦBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)
米根霉人可溶性白抗原GBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠apelin 12(AP12)
鋅指蛋白321B抗體云芝小鼠L細胞
內(nèi)臟異位相關(guān)蛋白/鋅指蛋白203抗體蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種山羊皮膚成纖維樣細胞
鋅指蛋白Zdhhc18抗體茯苓豬睪丸細胞
鋅指蛋白Zdhhc12抗體灰樹花人外周血B細胞
RSK抑制劑(LJH685)澳型核果褐腐病 甘松新酮
群結(jié)腐霉 曙紅Y(水溶)
粘著劍 曙紅B
明尼蘇打沙門氏 毛蘭
蒼黃擬無枝酸 天狼星紅BB
腸桿屬 虎紅
萊比托游動球 剛果紅
黑曲霉 甲基紅鈉
南方靈芝 甲基紅
珊瑚色諾氏 中性紅
枯草芽孢桿 中性紅
不等彎孢 山麥冬皂苷B
斑玉蕈 四氮唑藍
藤黃淺藤黃鏈霉 乙酰車前草酸甲酯
新疆薄層 四氮唑紫