詳細介紹
產品屬性:
英文名稱:VRT752271
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
VRT752271是一種可逆的,ATP競爭性的ERK1,ERK2抑制劑,對ERK2的IC50值<0.3nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:869886-67-9 別名:Ulixertinib 純度:99.86% 分子量:433.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
黃褐牛肝菌cRaf/Raf1抗原Anti-CDY1 AntibodyN-去乙?;?磺基轉移3(NDST3)
銅綠假單胞菌MEK1/MAPKK1抗體(N-端)Anti-CDYL2 AntibodyN-去乙?;?磺基轉移2(NDST2)
狹旋毛殼促腎上腺皮質激釋放因子Anti-CEACAM21 AntibodyN-去乙酰化/磺基轉移1(NDST1)
樟疫霉衰老抑制基因抗原Anti-CEBP Delta AntibodyN-聚糖1(NGLY1)
環形凸臍蠕孢環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原Anti-CEBPD AntibodyN-甲酰甲硫(FMET)
人纖維單胞菌降鈣抗原Anti-CEBPD AntibodyN-甲基DNA糖基化(MPG)
產氣莢膜梭菌 C型C端結合蛋白1抗原Anti-CEBPE Antibody人心鈉肽(ANP)聯免疫試劑盒
釀酒酵母淋巴相關抗原4/性T抗原-4Anti-CEBPE Antibody人心鈉肽(ANP)聯免疫試劑盒
鹽反硝化枝芽孢桿菌 心肌肌鈣蛋白Anti-CEBPZ Antibody人IL-17
大腸桿菌間隙連接蛋白32抗原Anti-CELA3B Antibody人IL-17
雷丸*間隙連接蛋白36抗原Anti-CEBPG Antibody人原鈣黏1(PCDH1)
枯草芽孢桿菌間隙連接蛋白40(多肽)Anti-CELSR1 Antibody人原鈣黏1(PCDH1)
灰色鏈霉菌趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原Anti-CELF1 Antibody人白介2受體(IL-2R)
楊奇青霉CX3C趨化因子受體1抗原Anti-CELSR2 Antibody人白介2受體(IL-2R)
蘇云金芽孢桿菌周期A抗原Anti-CELSR3/Flamingo homolog 1 Antibody人皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)
皺瓣革菌周期B1抗原Anti-CELSR3 Antibody人皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)
核糖核結合蛋白1抗體脫硫弧菌脫硫亞種(脫硫微螺菌、脫硫螺菌、脫硫桿菌、脫硫芽孢弧菌、脫硫弧菌)人急性BT淋巴細胞白血病
PDZ結構域蛋白GOPC抗體厭氧消化鏈球菌小鼠肥大細胞瘤細胞
B淋巴細胞受體相關蛋白抗體長野解普魯蘭桿菌人胃癌細胞(2013年新引進)(干細胞庫保藏)
睪丸特異性核苷果糖β抗體Pseudomonastoyotomiensis小鼠骨髓瘤細胞
ERK1,ERK2抑制劑(VRT752271)兩面神 Garcinexanthone A
蟬花 Furowanin A
膠孢 Fuegin
堅強芽胞桿 Fraxamoside
裂褶 Floribundone 1
大腸埃希氏 Fargesone B
擬莖點霉 桉樹腦
細孢毛霉 Erysubin B
銅綠假單胞 Epimedokoreanin B
茶樹菇 ent-Labda-8(17),13-dien-16,15-ol
乳桿屬 ent-11,16-Epoxy-15-hydroxykauran
Pilidium concavum Drimiopsin D
沼澤紅菇 Drimiopsin C
UNNASH/DF-1 Dregeoside Ga1
褶輪枝 Dregeoside Da1
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)