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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
NVP-ADW742 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1～3天 |
商品介紹：
NVP-ADW742(ADW742;GSK552602A)是IGF-1R選擇性抑制劑，IC50為170nM，比對InsR的抑制性強16倍，對HER2，PDGFR，VEGFR-2，Bcr-Abl和c-Kit活性極低。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：475488-23-4 別名：ADW742;GSK 552602A;ADW 純度：99.66% 分子量：453.58 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
草本枝孢Bacillus sp.大鼠血管生長(ANG)
芽胞桿菌屬Bacillus sp.大鼠角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)
嗜根考克氏菌Aeromonas sp.大鼠角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)
假蜜環菌Halobacillus sp.大鼠(cAMP)
根瘤菌Plesiomonas sp.大鼠(cAMP)
豌豆根瘤菌Pseudomonas pseudoalcaligenes大鼠(cAMP)
東方伊薩酵母Plesiomonas sp.大鼠(cAMP)
草青霉Pseudomonas solanacearum大鼠白活化黏附因子(ALCAM)
釀酒酵母Bacillus subtilis subsp. subtilis大鼠白活化黏附因子(ALCAM)
腸沙門氏菌腸亞種嬰兒血清型Staphylococcus saprophyticus大鼠白介9(IL-9)
葡萄糖桿菌屬Bacillus thuringiensis大鼠白介9(IL-9)
熱帶假絲酵母Bacillus cereus大鼠巨噬移動抑制因子(MIF)
腸沙門氏菌腸亞種伊斯特本血清型Blastochloris sp.大鼠巨噬移動抑制因子(MIF)
相思根瘤菌Halobacillus sp.大鼠轉化生長因子α(TGF-α)
釀酒酵母Aeromonas sp.大鼠轉化生長因子α(TGF-α)
寬雄腐霉Aeromonas sp.大鼠孕激/孕(PROG)
破傷風毒重鏈抗體平凡假單胞菌鴨疫里氏桿菌
內皮B受體抗體金黃節桿菌乳房鏈球菌
線粒體硫氧還蛋白2抗體硝基癒瘡木膠節桿菌氏桿菌
Toll樣受體7抗體死谷芽孢桿菌牛溶血鏈球菌
IGF-1R抑制劑（NVP-ADW742）球孢白僵 甲殼
弓形蟲(GT0－2株) 木聚糖
山西黑粉 麥芽糖一水合物
博伊丁假絲酵母 麥芽糖
紫穗槐根瘤 脂多糖
解脂假絲酵母解脂變種 昆布多糖
平田頭菇1-2 昆布多糖
釀酒酵母 D-山梨
臭曲霉 L-山梨糖
粟酒裂殖酵母 蔗糖
異角狀盤多毛孢 海藻酸
Bacillus 海藻酸鈉
汞速測盒 海藻糖
D-海藻糖
葡萄座腔 D-半乳糖
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