以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
SOCE抑制劑 | SKF-96365 hydrochloride | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
SKF-96365是SOCE的抑制劑,能夠在結直腸癌細胞里通過引起細胞周期阻滯和凋亡,表現抗腫瘤活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:130495-35-1 純度:99.73% 分子量:402.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
巨大芽孢桿菌離子轉運蛋白KCC4抗體Human PRKX ELISA Kit血影蛋白(spectrin)
解淀粉芽孢桿菌磷化離子通道蛋白Kv1.3抗體Human Presenilin-1 ELISA Kit血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)
雞油菌離子通道蛋白家族成員4抗體Human PREPL ELISA Kit血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)
熒光假單胞菌電壓門控性通道蛋白亞基kv5.1抗體Human PREP(Prolyl endopeptidase) ELISA Kit血小板源性生長因子D(PDGF-D)
蘑菇輪枝孢電壓門控性通道蛋白亞基kv6.1抗體Human PPT2 ELISA Kit血小板因子4(PF-4/CXCL4)
大腸埃希氏菌電壓門控性通道蛋白亞基KV6.3抗體Human PRH1 ELISA Kit血小板因子4(PF4)
弗雷德里克斯堡假單胞菌磷化內流通道蛋白KCNJ1抗體Human PRIC285 ELISA Kit血小板因子3(PF-3)
棲稻假單胞菌鈣激活通道蛋白KCNT2抗體Human PPWD1 ELISA Kit血小板衍生生長因子CC(PDGF-CC)
白僵菌內流通道蛋白Kir5.1抗體Human PQBP1 ELISA Kit血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)
好食脈孢菌磷化內流通道蛋白Kir5.1抗體Human PRICKLE1 ELISA Kit血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)
厚垣普奇尼亞菌*磷化ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體Human PRICKLE3 ELISA Kit血小板衍生生長因子(PDGF)
卷枝毛霉原變型電壓門控通道蛋白KVβ.2抗體Human PRAM1 ELISA Kit血小板衍化生長因子BB(PDGF-BB)
谷棒桿菌電壓門控性通道蛋白Kv1.4抗體Human CSNK2A1(Casein kinase II subunit alpha) ELISA Kit血小板衍化生長因子(PDGF)
黃柄曲霉電壓門控性通道Kv1.6抗體Human PRKAA2(5′-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2) ELISA Kit血小板型磷果糖激(PFKP)
根瘤菌磷化通道蛋白DRK1抗體Human PRIM1 ELISA Kit血小板相關免疫球蛋白(PAIg)
運動節桿菌電壓門控性通道Kv2.2抗體Human PRC1 ELISA Kit血小板相關抗體IgM(PA-IgM)
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質量規格:>99.0%(GC)新芒果苷
刺孢吸鏈霉菌北京變種Streptomyces│hygrospinosus var. beigingenis 質量規格:99.8原子%D芒果苷
鐮孢屬Fusarium│sp. 質量規格:>98.0%(T)果糖
SOCE抑制劑白地霉 五氟苯硫酚副結核抗體Elisa
短小芽孢桿 五氟β-防御Elisa
Rhizobium 2,3,4,5,6-五氟苯α乳清蛋白Elisa
發酵乳桿 3-乙蛋清白蛋白Elisa
短芽孢桿 2-氟-6-硝苯副結核分枝桿抗體Elisa
異常漢遜酵母 1-金剛烷α-半乳糖Elisa
細鏈格孢 1-溴金剛烷異鎖鏈Elisa
硬毛栓孔 1,4-雙(二苯膦基)丁烷I型膠原蛋白Elisa
濟南諾卡氏 三苯二酰基甘油Elisa
死亡谷芽孢桿 1,4-哌二乙磺酸二鈉鹽維生KElisa
帽形黃色土桿 3-氟苯基酸γ-谷氨酰環化轉移Elisa
大腸埃希氏 三苯基5-羥脯氨酸Elisa
黑根霉 (二甲基)苯基硅烷谷氨酰半胱氨酸連接Elisa
蟻巢傘屬 三基硅烷合成Elisa
淺黃金色單胞 基基硅烷肝型脂肪酸結合蛋白Elisa