詳細介紹
商品介紹:
GSK481能夠在HEK293T細胞中抑制RIP1WT S166的磷酸化。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1622849-58-4 別名:GSK481 純度:98.0% 分子量:377.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
GSK481 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
銅綠假單胞菌Atopobium minutum
淺紫灰直絲鏈霉菌Bacillus altitudinis
根瘤菌Bacillus amyloliquefaciens
pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puroBacillus barbaricus
大腸桿菌Bacillus cereus
黑傘屬Bacillus cereus
短芽孢桿菌Bacillus decolorationis
史氏芽孢桿菌Bacillus coagulans
鳥芽孢桿菌屬菌種Bacillus daliensis
枯草芽胞桿菌Bacillus gibsonii
異常漢遜酵母異常變種Bacillus firmus
蒼白堿線菌Bacillus halmapalus
枯草芽胞桿菌Bacillus ginsengi
香菇Bacillus ginsengi
pTrc99ABacillus halodurans
耐熱鹽土生古菌Bacillus halodurans
小鼠粘蛋白/粘液7(MUC7)免疫試劑盒α-輔肌動蛋白4(內參)抗體人CD30分子(CD30)二氫麻醉椒苫
小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)免疫試劑盒堿性磷抗體人CD30分子(CD30)二氫歐山芹醋酯
小鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC) 免疫試劑盒AU1 tag標簽抗體人CXC趨化因子受體1(CXCR1)二氫歐山芹當歸酯
小鼠粘蛋白/粘液2(MUC2)免疫試劑盒脂肪增強結合蛋白1人CXC趨化因子受體1(CXCR1)二氫歐山芹
RIP1WT S166磷酸化抑制劑(GSK481)SRPK1 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶SRPK1抗體 0.2ml
Ephrin A3 英文名稱: 酪酸蛋白激酶A3受體抗體 0.1ml
富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗體 Anti-SPARC 0.2ml
Anti-TGF- BetaR 3/FITC 熒光素標記轉移生長因子–β受體3抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAP4K4(Ser631) 磷酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 規格 0.1ml
ATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復制因子2(多肽)Multi-class antibodies規格: 0.5mg