詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Nissl body Staining Solution | 100ml | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
尼氏體(Nissl body)或稱尼氏小體是分布于神經細胞胞質內的三角形或橢圓形小塊狀物質,能被堿性染料如硫堇、亞甲藍、甲藍和焦油紫等染料染成紫藍色。各種神經細胞內都含有尼氏體,但其形狀、數量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和包體的軸丘。另外,尼氏體會因為生理狀態的變化而變化,尼氏體是神經元內合成蛋白質合成的重要部位,當神經元受到刺激后,包體內尼氏體會明顯減少。 尼氏染色液(Nissl Stain,焦油紫法)采用焦油紫(Cresyl violet)作為核心染料,焦油紫具有感光作用,能夠很好地顯示尼氏體變化。主要優點是操作簡便、染色穩定、適用范圍廣,可用于石蠟組織切片的尼氏物質、神經元等的染色,尼氏體的存在和消失是神經細胞是否受損的重要指標,當發生腦炎、腦缺血、軸突反應等情況時,尼氏體會發生溶解甚至消失。 組份: 焦油紫染色液 100mL 分色液 100mL 操作步驟(僅供參考): 1. 新鮮組織固定于乙醇、Carnoy 固定液或中性福爾馬林溶液后,常規脫水包埋。 2. 切片厚5μm(注意3),常規脫蠟至水。 3. 切片入焦油紫染色液中,將染缸置于37℃溫箱浸染10-30min。 4. 蒸餾水沖洗。 5. 入分色液中分化10s-20s,在顯微鏡下觀察至背景接近于無色為止。 6. 無水乙醇迅速脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。 7. 尼氏體:紫色;細胞核:淡紫色;細胞質:淡紫色。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
Oleanolic acid-3-O-β-D-gluc...英文名稱: Hematin磷化4E結合蛋白1抗體包裝1ml
Peritassine A英文名稱: PEG 800磷化4E結合蛋白1,2,3抗體包裝25ml
Pinocembrin 7-O-(3''-galloy...英文名稱: QuinestrolEpsin2B蛋白抗體包裝5ml
Presapogenin CP4英文名稱: Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom表皮生長因子抗體包裝1g
Prosapogenin CP6英文名稱: Propidium iodide表皮生長因子樣蛋白8抗體包裝5g
Raddeanoside 20英文名稱: Sodium dodecylbenzenesulfonateE3泛連接抗體包裝1g
Sapindoside A英文名稱: Sodium silicate hydrate小鼠抗表皮生長因子抗體包裝200mg
Smyrindioloside英文名稱: Bluo-Gal抗表皮生長因子抗體包裝1g
Thonningianin A英文名稱: Disodium hydrogen phosphate dihydrate內皮受體蛋白酪激A2+A3+A4抗體包裝250mg
Tokinolide B英文名稱: Neutral Protease from Bacillus polymyxa磷化內皮受體蛋白酪激A2+A3+A4抗體包裝5g
Triptonine B英文名稱: PEG 200磷化內皮受體蛋白酪激A3+A4+A5抗體包裝25g
α-倒捻子(標準品)英文名稱: Sodium carbonate, decahydrate轉錄因子Ets差異基因5抗體包裝5g
α-蒎烯英文名稱: Aluminum oxide, activeE選擇抗體包裝1g
α-乳香英文名稱: D-Tartaric acid hydrate大腸桿菌耐熱性腸抗體包裝5g
α-石竹烯英文名稱: Indole泛激活E1抗體包裝1g
都柏林沙門氏菌Salmonella│dublin 質量規格:HPLC>99%,標準品四氫生物蝶呤試劑盒人參皂苷CK;20(S)-Ginseno
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98%四連接試劑盒人參皂苷F2;Ginsenoside F
明膠樣鏈霉菌Streptomyces│gelaticus 質量規格:>98%,標準品死亡相關蛋白1試劑盒人參皂苷F1;Ginsenoside F
尼氏小體染色液黑腐皮殼 磷酸苯基酯粘蛋白1抗體Elisa
長枝木霉 3′,4′-二氯苯乙酮脫嘌呤脫嘧啶核酸內切1抗體 Elisa
褐離褶傘 丁酸己酯博卡病IgG抗體Elisa
地生鱗傘 4-正戊基博卡病IgM抗體Elisa
釀酒酵母 (S)-(-)-1-苯基乙酮酸羧化Elisa
雙孢蘑菇 酚磺乙磷酸A1Elisa
錐形赤褶菇2-2 2-氨基-3-甲基-5-氟吡啶絡氨酸激受體-1Elisa
蒂蓋姆頭珠霉 環己溴氫酸鹽抗腦血管內皮抗體Elisa
豬丹絲 聚二環氧乙烷甲基肌酐Elisa
盤長孢狀盤孢 2,5-二氟苯磺酰氯煙曲霉IgG抗體Elisa
聚紅粉端孢霉 2-(2'-羥基-3',5'-二叔戊基苯基)苯并三唑鋅指蛋白20Elisa
淡紫褐鏈霉 5-氯-3-甲基吡啶-2-羧酸肝Elisa
根瘤 1,2:5,6-雙鄰異亞基-alpha-D-異構呋喃糖鋅指蛋白288抗體Elisa
根瘤 氯苯胍鹽酸鹽抗人組織谷酰轉移分泌型IGA抗體Elisa
*冬蟲夏草 2,2-二甲基-5-(2,5-二氧基)戊酸胰彈力蛋白Elisa