詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:ERK5抑制劑(ERK5-IN-1)
英文名稱:ERK5-IN-1
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
ERK5-IN-1有效抑制ERK5,EC50為0.19μM,IC50為0.087μM,抑制LRRK2[G2019S]時,IC50為0.026μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1234479-76-5 純度:98.62% 分子量:459.54 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
海岸擬諾氏菌全血基因組DNA試劑盒Escherichia coli小鼠神經肽Y(NP-Y)
銹色淺野氏菌酵母基因組提試劑盒Escherichia coli小鼠生長激釋放多肽(GHRP)
大腸埃希氏桿菌質粒小量提試劑盒Escherichia coli小鼠生長激釋放多肽(GHRP)
運動節桿菌凝膠回收試劑盒Escherichia coli小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)
焦曲霉DNA產物純化試劑盒Escherichia coli小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)
球孢白僵菌植物基因組試劑盒Escherichia coli小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)
巴基斯坦賴芽孢桿菌細菌基因組試劑盒Escherichia coli小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)
威克克魯維酵母動物/組織基因組試劑盒Escherichia coli小鼠血栓前體蛋白(TpP)
膠孢T4 DNA連接Escherichia coli小鼠血栓前體蛋白(TpP)
Pragia sp.T4 DNA連接Escherichia coli小鼠促性腺激釋放激(GnRH)
墳墓節桿菌T4 DNA 激Escherichia coli小鼠促性腺激釋放激(GnRH)
黃色短桿菌T4 DNA 激Escherichia coli小鼠抑制B(INH-B)
解淀粉芽孢桿菌重組Taq DNA 聚合Escherichia coli小鼠抑制B(INH-B)
孟氏假單胞菌重組Taq DNA 聚合Escherichia coli小鼠促甲狀腺釋放激(TRH)
釀酒酵母重組Taq DNA 聚合Escherichia coli小鼠促甲狀腺釋放激(TRH)
長枝木霉重組Taq DNA 聚合Escherichia coli小鼠促腎上皮質激釋放激(CRH)
2型神經纖維瘤抗體須殼孢新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞
NFkB誘導激抗體茶葉葉點霉人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株
細胞核因子/k基因結合核因子抗體露濕粘座孢霉(或露濕漆斑菌)人APP基因轉染CHO細胞株
低分子量神經絲蛋白抗體爪哇毛霉C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-)
ERK5抑制劑(ERK5-IN-1)褐球固氮 2,5-雙(5-叔丁基-2-苯并惡唑基)噻吩
滑菇 葉黃
大豆慢生根瘤 司盤85
植物乳桿 褪黑
長喙殼 山梨酸
球孢白僵 司盤80
枯草芽孢桿 三七總皂苷
*紅城紅球 沒食子酸乙酯
香草蘭根疾 黃芪黃酮
黃綠鏈霉 司盤60
曼被孢霉 槐角苷
毛頭鬼傘(雞腿菇) 槐定堿
解脂假絲酵母 番茄紅
抗生鏈霉 丹寧酸
細鏈格孢