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詳細介紹
商品介紹：
EIPA是一種TRPP3channel抑制劑，其IC50值為10.5μM。EIPA還抑制Na+/H+交換器(NHE)和巨噬細胞的增多。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1154-25-2 別名：L593754;MH 12-43;Ethylisopropylamiloride 純度：99.73% 分子量：299.76 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性：
英文名稱：EIPA
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Botryosphaeria parva Paenibacillus macerans豬高鐵血紅蛋白(MHB)
釀酒酵母Bacillus subtilis subsp. subtilis豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)
棲植物潘尼亞堿湖桿菌Geobacillus stearothermophilus豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)
法布里德巴酵母Geobacillus stearothermophilus豬低分子肝(LMWH)
產棒桿菌Paenibacillus polymyxa豬低分子肝(LMWH)
根瘤菌Paenibacillus polymyxa豬單核增多性李斯特菌O((LLO)
粘著劍菌*Geobacillus stearothermophilus豬單核增多性李斯特菌O((LLO)
球孢白僵菌Geobacillus stearothermophilus豬瘟病抗體
核盤菌Geobacillus stearothermophilus豬瘟病抗體
平臍蠕孢菌Paenibacillus macerans豬瘟抗原2板
釀酒酵母Brevibacillus laterosporus豬瘟抗原2板
雅致曲霉Geobacillus stearothermophilus植物磷脂酰甘油(PG)
支氣管敗血波氏菌Paenibacillus macerans植物磷脂酰甘油(PG)
少孢酵母Bacillus subtilis subsp. subtilis植物玉米索核苷（ZR ）
Bacillus tequilensis Bacillus licheniformis植物玉米索核苷（ZR ）
豌豆根瘤菌Paenibacillus polymyxa植物赤霉（GA）
5-脂氧合抗體突尼斯葉桿菌口蹄疫病毒（A2亞型）
2，4-二氧乙除草劑單克抗體嗜糖克布特里氏菌口蹄疫病毒（A3亞型）
核突觸蛋白-α抗體N端抗生溶桿菌(抗生溶桿菌)綿羊痘病毒
細胞因子信號傳導抑制蛋白2抗體梭狀梭菌偽狂犬病病毒
TRPP3channel抑制劑(EIPA)SATB1 英文名稱： 核基質結合區結合蛋白1抗體 0.1ml
Escherichka coli K99 英文名稱： 豬源產腸毒素性大腸桿菌K99抗體 0.2ml
P選擇素抗體 Anti-P-selectin 0.1ml
Anti-Synapsin II /FITC 熒光素標記神經突觸素2抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Met(Tyr1349) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體 規格 0.1ml
HIV-1(gp41) 艾滋病病毒(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg
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