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詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產品屬性：
中文名稱：mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)
英文名稱：OSI-027
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期：1～3天
商品介紹：
OSI-027是mTORC1和mTORC2選擇性抑制劑，IC50為22nM和65nM，比對PI3Kα，PI3Kβ，PI3Kγ和DNA-PK的抑制性高100倍。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：936890-98-1 純度：98.15% 分子量：406.44 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
矩圓黑盤孢腎結合蛋白抗體Anti-DKK2 Antibody載脂蛋白A2(APOA2)
科羅拉多擬無枝菌RET指蛋白樣2/3抗體Anti-DLD Antibody(PB0608)載脂蛋白A1(APOA1)
釀酒酵母RFESD蛋白抗體Anti-DLG1 Antibody(PB0592)甾-O-酰基轉移2(SOAT2)
灰色鏈霉菌灰色亞種胰島再生因子β抗體Anti-DLG4 Antibody甾-O-酰基轉移1(SOAT1)
莢膜紅細菌環指蛋白160抗體Anti-DLG3 Antibody運動因子相關蛋白1(MRP1)
微桿菌屬視黃脫氫13抗體Anti-DLG4 Antibody(PB0859)運動神經元生存蛋白2(SMN2)
辣椒盤孢環指蛋白75抗體Anti-DLL1 Antibody孕烷X受體(PXR)
橙鱗傘8RIT1蛋白抗體Anti-DLL3 Antibody孕免疫調節結合因子1(PIBF1)
大腸埃希氏菌環指蛋白19B抗體Anti-DLL4 Antibody孕(Pg)
橙灰紫旋鏈霉菌胰島β生長因子抗體Anti-DMRT1 Antibody原肌球調節蛋白4(TMOD4)
腸沙門氏菌腸亞種波恩血清型環指蛋白149抗體Anti-DNAJA2 Antibody原肌球調節蛋白3(TMOD3)
地衣芽孢桿菌心臟蛋白磷1結合蛋白/環指蛋白158抗體Anti-DMD Antibody(PB0292)原肌球調節蛋白2(TMOD2)
烏洛托品甲速測管環指蛋白180抗體Anti-DNAJA1 Antibody原肌球調節蛋白1(TMOD1)
茶藨子葡萄座腔菌環指蛋白123抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白4(TPM4)
弗雷德里克斯堡假單胞菌軟骨肉瘤相關蛋白2抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白3(TPM3)
豇豆慢生根瘤菌環指蛋白210抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白2β(TPM2)
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格：>98%,BR
微小鏈霉菌Streptomyces│parvulus 質量規格：HPLC>99%,標準品
: 205234資源名稱: 福氏志賀氏菌 質量規格：>98%,BR
mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)冷海水黃桿 2-氨基-3-神經型一氧化氮合成Elisa
乳白居真細 酚紅葡萄糖肉湯偽狂犬病病GPI抗體Elisa
Paraburkholderia contaminans 硝酸鹽肉湯偽狂犬病GB抗體Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 代硅烷偽狂犬病GE抗體Elisa
雞傷寒沙門氏 動力-硝酸鹽培養基（A法）熱休克蛋白90Elisa
煙色紅曲霉 木糖-明膠培養基圓環病Elisa
乳酸克魯維酵母 (4S,4'S)-2,2'-(戊烷-3,3'-二基)雙(4-芐基-4,5-二氫惡唑)副豬嗜血桿Elisa
天花板節桿 4-芐溴非洲豬瘟Elisa
玫瑰小雙孢 4-苯基-1,2,4-三唑烷-3,5-二酮口蹄疫A型抗體Elisa
Leucostoma niveum 4-聯苯結蛋白Elisa
匿名曲霉 芐基溴化鎂圓環病2型抗體Elisa
大腸埃希氏 3-甲氧基-1-轉化生長因子Elisa
可可鏈霉可可亞種 4-氟苯基乙硫生長因子Elisa
生孢梭 檸檬酸酯清道夫受體Elisa
蘋果雙殼 5-基口蹄疫病IgA抗體Elisa
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