詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
VX-765 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
VX-765是一種的IL-轉化酶/caspase-1抑制劑,抑制IL-1β釋放。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:273404-37-8 別名:Belnacasan 純度:99.46% 分子量:509.0 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
王不留行(標準品)英文名稱: Acetylcorynoline黑色瘤相關抗原B2抗體包裝1g
王不留行環肽A英文名稱: 3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid黑色瘤相關抗原B4抗體包裝120mg
王不留行環肽B英文名稱: Isobavachalcone組蛋白乙酰轉移抗體(腦膜瘤表達抗原5)包裝1g
王不留行黃苷(標準品)英文名稱: Isobavachin磷化微管相關蛋白4抗體包裝250mg
威靈仙(綿團鐵線蓮)(標準品)英文名稱: Angelicin黑色瘤相關抗原B3抗體包裝1g
威靈仙(標準品)英文名稱: Isobergapten鋅指蛋白801抗體包裝5g
維采寧2英文名稱: IsoliquiritinNDUFS2抗體包裝1g
維生B2(標準品)英文名稱: Ramatroban;BAY u3405NDUFAF4抗體包裝5g
維生D2(標準品)英文名稱: Isorhynchophylline分化相關基因NDRG1抗體包裝100g
維斯阿米-4'-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-...英文名稱: luteolin-6-C-glucoside神經降壓抗體包裝25g
偽金絲桃英文名稱: Isoquercitrin核受體輔助抑制因子2抗體包裝25g
偽原薯蕷皂苷(標準品)英文名稱: Isopimpinellin核仁磷蛋白抗體包裝5g
委陵菜(標準品)英文名稱: Isoacteoside嗜中性粒胞漿因子4抗體包裝1g
衛矛堿英文名稱: Isochlorogenic acid A磷化核因子NF-κB p65抗體包裝5g
文多靈(標準品)英文名稱: Isochlorogenic acid B磷化一氧化氮合成3(內皮型)抗體包裝1g
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>99%,BR巨噬炎性蛋白3α試劑盒常春藤苷D;Hederacoside D
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:≥99.0%,BR巨噬炎性蛋白2試劑盒常春藤苷C;Hederacoside C
曲霉Aspergillus│sp. 質量規格:HPLC≥98%, 標準品巨噬炎性蛋白1β試劑盒草質苷;Rhodionin;Herba
IL-轉化酶/caspase-1抑制劑(VX-765)中心體蛋白110抗體端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測試劑盒NT-ProANP ELISA Kit
纖維端前腦鈉(NT-ProBNP)檢測試劑盒NT-ProBNP ELISA Kit
分裂周期蛋白14B抗體阿黑皮原(POMC)檢測試劑盒POMC ELISA Kit
1號染色體開放閱讀框177抗體δ樣蛋白1同源物(δLK1)檢測試劑盒δLK1 ELISA Kit
1號染色體開放閱讀框183抗體γ-內啡肽(γEP)檢測試劑盒γEP ELISA Kit
克侖特羅/抗體γ-谷酰轉移1(γGT1)檢測試劑盒γGT1 ELISA Kit
6號染色體開放閱讀框151抗體γ-丁A受體α2(γABRα2)檢測試劑盒γABRα2 ELISA Kit
15號染色體開放閱讀框52抗體γ-丁(γABA)檢測試劑盒γABA ELISA Kit
2號染色體開放閱讀框89抗體β-血小板球蛋白(βTG)檢測試劑盒βTG ELISA Kit