M2亞基抑制劑(Triapine)公司正在出售的產品：A Raf(phospho Ser214)/FITC 熒光標記化A-Raf抗體IgG殺蟲單 分析標準品
A Raf/ARAF/FITC 熒光標記A-Raf抗體IgG戊唑 分析標準品，99%
Phospho-A Raf (Ser299) /FITC 熒光標記化A-Raf抗體IgG苯磺隆 分析標準品，95%
Phospho-A Raf (Ty

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。

建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
根癌土壤桿菌熒光Cy3標記猴IgGAnti-INHBC Antibody人抗乙型肝炎病表面抗體(HBsAb)

白馬勃熒光Cy3標記猴IgMAnti-INSL4 Antibody人抗乙型肝炎病表面抗體(HBsAb)

弗氏檸檬桿菌熒光Cy3標記小鼠IgMAnti-IP6K2 Antibody人抗乙型肝炎病e抗體(HBeAb)

雜色曲霉熒光Cy3標記豬IgGAnti-INTS2 Antibody人抗乙型肝炎病e抗體(HBeAb)

長雙歧桿菌長亞種熒光Cy3標記水貂IgGAnti-IPO9 Antibody人抗流行性出血熱病抗體IgM (EHF)

平臍蠕孢菌熒光Cy3標記兔IgMAnti-IPMK Antibody人抗流行性出血熱病抗體IgM (EHF)

杏鮑菇熒光Cy3標記大鼠IgMAnti-IPPK Antibody人抗狂犬病抗體(anti-RV)

豇豆慢生根瘤菌熒光Cy3標記重組人白介-1受體拮抗劑Anti-IPPK Antibody人抗狂犬病抗體(anti-RV)

巴氏微桿菌熒光Cy3標記血藍蛋白Anti-IRF1 Antibody人抗甲型肝炎病IgM抗體(anti-HAV)

德沃斯氏菌熒光Cy3標記雞卵白蛋白Anti-IQCB1 Antibody人抗甲型肝炎病IgM抗體(anti-HAV)

假單胞菌屬熒光Cy3標記人血白蛋白Anti-IRF4 Antibody人抗甲型肝炎病IgG抗體(anti-HAV)

擬粉紅鎖擲孢酵母熒光Cy3標記胰糜蛋白Anti-IQGAP3 Antibody人抗甲型肝炎病IgG抗體(anti-HAV)

硫磺菌Alexa Fluor 555標記羊IgG(流式同型對照)Anti-IRS1 Antibody人抗副流感病IgM抗體(anti-PIV IgM)

植物乳桿菌植物亞種Alexa Fluor 555標記大鼠IgG(流式同型對照)Anti-IRX1 Antibody人抗副流感病IgM抗體(anti-PIV IgM)

科大百平（平菇類）熒光PE-Cy7標記兔IgG(流式同型對照)Anti-IRX2 Antibody人抗丁型肝炎病抗體(anti-HDV)

淡黑假黑盤菌辣根過氧化物標記生物Anti-IRX3 Antibody人抗丁型肝炎病抗體(anti-HDV)

環指蛋白87金頭曲霉人套細胞淋巴瘤細胞

環指蛋白44抗體無殼曲霉人前B細胞白血病細胞

環指蛋白86糙孢曲霉人彌漫性大B細胞淋巴瘤細胞

環指蛋白2抗體洋蔥曲霉人白血病細胞
M2亞基抑制劑(Triapine)弗雷德里克斯堡假單胞 Procumbide

奶酪發酵小短桿 prim-O-Glucosylangelicain

盤長孢狀盤孢 前異菖蒲烯二

大腸埃希 羅漢松黃酮 A.

擬層孔 p-Menth-8-ene-1,2-diol

巴貝斯蟲（青海剛察株） 雞蛋花甙

枯草芽孢桿 闊葉酮

爪哇根霉 Platyphyllenone

季也蒙假絲酵母 匹西狄A

嗜低溫游動微 Pisatin

綠產色鏈霉 Piptocarphin A

乳粉  單核增生李斯特氏（陰性）  Piperlotine D

澳型核果褐腐病 Piperlotine C

澳型核果褐腐病 Piperenone

禾谷鐮孢 松柏酸