詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
AST-1306 TsOH | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
AST-1306TsOH是不可逆的EGFR和ErbB2抑制劑,IC50分別為0.5nM和3nM,對突變型EGFR T790M/L858R同樣有抑制性,對ErbB家族的抑制性比其它激酶強3000倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1050500-29-2 別名:AST-1306 (p-Toluenesulfonic acid);AST1306 (p-Toluenesulfonic acid);AST 1306 (p-Toluenesulfonic acid) 純度:98.85% 分子量:621.08 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
枯草芽孢桿菌枯草亞種人腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子Bacillus thuringiensis小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)
白僵菌人IPO-38蛋白Bacillus thuringiensis小鼠纖溶抗纖溶復合物(PAP)
枯草芽孢桿菌人切除修復交叉互補基因1Bacillus thuringiensis小鼠纖溶抗纖溶復合物(PAP)
銅綠假單胞菌人羰基化蛋白Bacillus thuringiensis小鼠凝血抗凝血復合物(TAT)
綠色木霉人磷化核因子κB抑制蛋白α(IKKα human ELISA kit)Bacillus thuringiensis小鼠凝血抗凝血復合物(TAT)
釀酒酵母人樁蛋白Bacillus thuringiensis小鼠抗凝血受體(ATR)
彎孢人小表皮粘蛋白Bacillus thuringiensis小鼠抗凝血受體(ATR)
大腸埃希菌人類似60S核糖體蛋白L21Bacillus thuringiensis小鼠凝血受體(TR)
紫色鏈霉菌人類粘蛋白2Bacillus thuringiensis小鼠凝血受體(TR)
平滑假絲酵母人MAX二聚化蛋白1Bacillus thuringiensis小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)
硬皮馬勃屬人水閘蛋白14Bacillus thuringiensis小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)
銹色野野村氏菌人可溶性半乳糖苷結合凝集3Bacillus thuringiensis小鼠磷肌3激(PI3K)
乳粉 沙門氏菌(陰性)人主要穹窿蛋白Bacillus thuringiensis小鼠磷肌3激(PI3K)
小卷霉人泛蛋白DBacillus thuringiensis小鼠β內啡肽(β-EP)
露濕漆斑菌人toll樣受體2Bacillus thuringiensis小鼠β內啡肽(β-EP)
米根霉年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關蛋白2Bacillus thuringiensis小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)
少突膠質細胞轉錄因子2抗體豹斑毒鵝膏菌正常大鼠腎細胞
增食欲B/欲激B亞巴馬全緣孔菌洲綠猴腎細胞
寡腺苷合成-1斑點嗜藍孢孔菌人APP-PS1雙基因轉染CHO細胞株
陽離子轉運器1抗體小果雞樅小鼠睪丸上皮細胞15P-1(干細胞庫保藏)
EGFR和ErbB2抑制劑(AST-1306 TsOH)銹赤蠟黃鏈霉 青霉鏈霉兩性霉B溶液
紫紅曲霉 柳穿魚黃
枯草芽孢桿 戈米辛J
迂回殼囊孢 青霉鏈霉溶液
草假單胞 青霉
大腸埃希氏 偽綿馬
鄉間假絲酵母 青霉鈉
綠色產色鏈霉 制霉
短波單胞屬 新霉硫酸鹽
叢赤殼 6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷
球孢白僵 寡霉
氈毛青霉 仙鶴草D
凝結芽孢桿
巨大芽胞桿 那霉硫酸鹽
釀酒酵母 慶大霉硫酸鹽