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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
GW 441756 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1～3天 |
商品介紹：
GW441756是特異的高活性原肌球蛋白相關激酶A（TrkA）抑制劑，IC50為2nM，對c-Raf1和CDK2幾乎無活性。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：504433-23-2 純度：99.00% 分子量：275.3 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
寡養單胞菌屬人輪狀病IgMAnti-TLK2 Antibody人小表皮粘蛋白(SBEM)
淺玫瑰小單孢菌大鼠遲現抗原Anti-TLR1 Antibody 人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)
枯草芽孢桿菌大鼠降鈣Anti-TMBIM1 Antibody人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)
Bacillus pervagus人艾柯病IgMAnti-TLR13 Antibody人類粘蛋白2(ORM2)
環帶青霉人抗呼吸道合胞病抗體Anti-TMBIM1 Antibody人類粘蛋白2(ORM2)
棉尾孢大鼠骨鈣/骨谷蛋白Anti-TMBIM1 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)
金直絲鏈霉菌大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基Anti-TMBIM4 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)
釀酒酵母人麻疹病IgMAnti-TMC8 Antibody人水閘蛋白14(CLDN14)
肺形側耳人柯薩奇病IgMAnti-TMEM101 Antibody人水閘蛋白14(CLDN14)
泡盛曲霉大鼠促甲狀腺Anti-TMEM145 Antibody人可溶性半乳糖苷結合凝集3(Lgals3)
大腸埃希氏菌大鼠皮質Anti-TMEM101 Antibody人可溶性半乳糖苷結合凝集3(Lgals3)
糞纖維單胞菌人柯薩奇病IgGAnti-TMEM173 Antibody人主要穹窿蛋白(MVP)
枯草芽孢桿菌大鼠雌二Anti-TMEM185A Antibody人主要穹窿蛋白(MVP)
短乳桿菌人結核菌桿抗體IgGAnti-TMEM30B Antibody人泛蛋白D(UBD)
紅球菌人瘢痕性天皰瘡抗體Anti-TMEM237 Antibody人泛蛋白D(UBD)
生癌腸桿菌大鼠脫氫表雄硫酯Anti-TMEM30CP Antibody人toll樣受體2(TLR2)
神經突起生長誘導因子受體UNC5D抗體蘇云金芽孢桿菌黑克亞種抗孕7
神經突起生長誘導因子受體Unc5a抗體蘇云金芽孢桿菌幕蟲亞種抗睪小鼠7
UBX結構域域蛋白D2抗體蘇云金芽孢桿菌以色列亞種抗型肝炎病毒NS5抗原單克抗體7株
泛硫酯L3抗體蘇云金芽孢桿菌日本亞種抗戍型肝炎病毒單克抗體7株
TrkA抑制劑（GW 441756）枯草芽孢桿 水甘草堿
白靈側耳 沙蟾精
光神農球 三十烷
種中心 生活飲用水耐熱大腸群質控樣品（多管發酵法） Ⅳ
香菇 Ⅲ
寬鱗大孔 Ⅱ
茯苓 Ⅰ
淺黃假單胞 三聚
黑木耳(雜310) 3,4,5-氧基
植物內芽孢桿 3,4,5-氧基甲酯
層出鐮孢
樹舌4-2 肉蓯蓉苷A
白蠟多年臥孔 瑞香二甲
茶藨子葡萄座腔 瑞香-7-甲
釀酒酵母 人參皂苷Rk3
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