產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CDK2抑制劑(NU6300)
英文名稱:NU6300
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
NU6300是一種共價(jià)的ATP競(jìng)爭(zhēng)性CDK2抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 純度:97.44% 分子量:413.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鏈霉菌人EB病IgMAnti-THOC5 Antibody人磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)
陰溝腸桿菌大鼠抵抗Anti-THRA Antibody人受磷蛋白(PLN)
釀酒酵母人EB病IgAAnti-THOC5 Antibody人受磷蛋白(PLN)
血鏈球菌大鼠催乳Anti-THRB Antibody人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)
短裙竹蓀2-1大鼠促生長(zhǎng)激釋放激Anti-TIE1 Antibody人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)
腫大地桿菌人EB病IgGAnti-TIF-IA Antibody人IPO-38蛋白(IPO38)
白色念珠菌人什曼原蟲抗體Anti-TIGD3 Antibody人IPO-38蛋白(IPO38)
茶盤長(zhǎng)孢*大鼠促腎上腺皮質(zhì)激Anti-TIMP3 Antibody人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)
雜色曲霉大鼠促卵泡Anti-TK Antibody人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)
寡鞘單胞菌人登革熱抗體Anti-TKFC Antibody人羰基化蛋白(PC)
梭狀芽孢桿菌人流感病抗體IgGAnti-TK1 Antibody人羰基化蛋白(PC)
微小桿菌大鼠雌二受體Anti-TKFC Antibody人磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)
閆遜初氏菌人腺病IgMAnti-TLE2 Antibody人磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)
釀酒酵母大鼠前心鈉肽Anti-TLE1 Antibody人樁蛋白(Pax)
大腸埃希氏桿菌大鼠大內(nèi)皮Anti-TLE4 Antibody人樁蛋白(Pax)
墳?zāi)构?jié)桿菌人腺病IgGAnti-TLK1 Antibody人小表皮粘蛋白(SBEM)
葡萄膜自身抗原Uaca抗體鐮孢霉抗人TNFRII小鼠7
肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白相關(guān)蛋白1抗體擬莖點(diǎn)霉(斜面)抗人IgE小鼠7
神經(jīng)突起誘導(dǎo)因子受體UNC5B抗體淡紅側(cè)耳抗肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)7
神經(jīng)突起生長(zhǎng)誘導(dǎo)因子受體UNC5B抗體交鏈孢霉抗副甲型沙門氏菌單克抗體7株
CDK2抑制劑(NU6300)檸檬酸桿屬 -4’-葡萄糖苷
軸向海山鹽單胞 石蒜堿
肺炎克雷伯氏 山豆根色滿二氫黃酮Ⅰ
釀酒酵母 山椒子烯
傳染性法氏囊病病 山椒子烯酮
交替紅色桿屬 四氫姜黃
禾稈鐮孢霉 鯊肌
仙臺(tái)鏈霉 石杉?jí)A乙
植物乳桿 三尖杉?jí)A
蘇云金芽孢桿 蘇木
*百脈根根瘤 商陸皂苷元
香菇 麝香草
解脂亞羅酵母 2-O-alpha-L-鼠李吡喃糖甙鳶尾酮
硫磺 尚含雞納甙
金針菇F9309 雙酮草酸鹽
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)