EGFR突變體抑制劑(Naquotinib mesylate)公司正在出售的產(chǎn)品：Leptin receptor(long) /FITC 熒光標(biāo)記瘦受體抗體（長）IgG2,5-二 99%
Leptin receptor(long)/FITC 熒光標(biāo)記瘦受體抗體（長）IgG2,5-二 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99.8%
LFABP/FABP-1 /FITC 熒光標(biāo)記肝臟型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgG2, 2’

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

Bacillus vireti人布魯氏菌抗體IgGAnti-TF2E2 Antibody人高敏甲狀腺(u-T4)

猴頭菇大鼠游離β絨毛膜促性腺激Anti-TESK2 Antibody人高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)

青霉人水痘帶狀皰疹病IgMAnti-TFAP2A Antibody人高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)

釀酒酵母大鼠固Anti-TF2H2 Antibody人多巴(DA)

根桿菌大鼠去甲腎上腺Anti-TFDP2 Antibody人多巴(DA)

蘇云金芽孢桿菌人水痘帶狀皰疹病IgGAnti-TFE3 Antibody人(AZT)

禾谷絲核菌大鼠前列腺FAnti-TFG Antibody人(AZT)

根霉屬人軍團(tuán)菌抗體IgAAnti-TGFB1 Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)

釀酒酵母大鼠前列腺E1Anti-TGFB1I1 Antibody人促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)

假單胞菌人軍團(tuán)菌抗體IgMAnti-TGFB2 Antibody人促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)

惡臭假單胞菌人軍團(tuán)菌抗體IgGAnti-TGFBR3 Antibody人促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)

釀酒酵母大鼠皮質(zhì)/腎上腺Anti-THAP4 Antibody人甲狀腺球蛋白(TG)

樟疫霉人腮腺炎病IgMAnti-THBD Antibody人甲狀腺球蛋白(TG)

葡萄球菌屬大鼠內(nèi)皮1Anti-TGFB3 Antibody人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)

大肥菇人腮腺炎病IgGAnti-THBS2 Antibody人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)

假單胞菌屬大鼠血管舒緩激肽Anti-THBS4 Antibody人磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)

尿苷二磷葡萄糖醛轉(zhuǎn)移2B4抗體黃多孔菌抗補(bǔ)體B因子小鼠7

泛激活2B抗體局限青霉抗補(bǔ)體I因子小鼠7

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白UNC93B抗體可可球二孢抗乳鐵蛋白小鼠7

結(jié)腸癌抗原16抗體帚枝霉屬（斜面）抗大鼠IgG小鼠7
EGFR突變體抑制劑(Naquotinib mesylate)抗壞血酸克呂沃爾氏 水合氧化前胡

大豆慢生根瘤 松柏

山地青霉 水仙環(huán)

新月彎孢 酸棗仁皂苷B1

樹舌 水黃皮

南分枝桿 石蒜裂堿

釀酒酵母 四氫洲防己堿

腦膜炎奈瑟氏球 石松靈堿

賽洛蒙尼假單胞 山羊豆堿

Desulfuromonas 酸藤子

洋蔥伯克霍爾德 四氫黃連堿

釀酒酵母 似梨木雙黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷

紫紅曲霉 α-松油

枯草芽孢桿 三七

枯草芽孢桿 -3-O-β-D-槐糖苷