化工儀器網
詳細介紹
商品介紹：
CI-1040（PD184352）是高度特異的MEK小分子抑制劑，對MEK1的IC50值為17nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：212631-79-3 別名：PD 184352 純度：99.72% 分子量：478.66 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性：
中文名稱：MEK小分子抑制劑(CI-1040)
英文名稱：CI-1040
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
中國克魯維酵母淋巴管內皮和血管內皮受體1抗體Anti-Ferritin Antibody血栓烷受體(TP)
露濕漆斑菌鞭毛蛋白2抗體Anti-FES Antibody血栓A2(TXA2)
硬結節桿菌跨膜蛋白SEMA5A抗體Anti-FFAR1 Antibody血色病蛋白(HFE)
香菇IQCJ抗體Anti-FGA Antibody血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)
糞腸球菌*SH2結構域蛋白C3抗體Anti-FGA Antibody血清淀粉樣P物質(SAP)
日本色鹽桿菌2型豬鏈球菌溶血抗體Anti-FGB Antibody血漿過氧化物(GPX3)
解鳥克雷伯菌肺表面活性蛋白A抗體Anti-FGF1 Antibody血紅氧合2(HO2)
綠色鏈霉菌肺表面活性蛋白A抗體Anti-FGF1 Antibody血紅氧合1(HO1)
多粘類芽孢桿菌葡萄糖-6磷轉運蛋白抗體Anti-FGF1 Antibody血紅結合蛋白(HPX)
枯草芽孢桿菌線粒體琥珀脫氫D抗體Anti-FGF1 Antibody血紅蛋白μ(HBμ)
叢毛紅曲類固硫酯抗體Anti-FGF10 Antibody血紅蛋白θ1(HBθ1)
腐質霉固調節元件結合蛋白裂解激活蛋白抗體Anti-FGF10 Antibody血紅蛋白ζ(HBζ)
傘枝犁頭霉轉運蛋白家族39成員7抗體Anti-FGF13 Antibody血紅蛋白ε1(HBε1)
迪吉氏黃桿菌碳氫鈉協同轉運蛋白4-A4突變型抗體Anti-Fgf19(Fgf15) Antibody血紅蛋白δ(HBδ)
木賊鐮刀菌磷化認知缺陷突觸相關蛋白SynGAP抗體Anti-FGF19 Antibody血紅蛋白γ2(HBγ2)
Sphingobium fuliginis Syndecan 3蛋白抗體Anti-FGF19 Antibody血紅蛋白γ1(HBγ1)
染色體結構維持蛋白2抗體空腸彎曲菌hFoB1.19:SV40轉染人成骨細胞
染色體結構維持蛋白5抗體液化沙雷氏菌MGC80-3人胃癌細胞
染色體結構維持蛋白6抗體黑曲霉 ACHN人腎癌細胞
SLAMF6抗體淺白隱球酵母3T3-L1小鼠脂肪細胞
MEK小分子抑制劑(CI-1040)新月彎孢 酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基（YPD）白介12Elisa
大腸埃希 真培養基硒蛋白P1Elisa
節桿 液體硫乙酸鹽培養基（不含瓊脂）瘟病抗體Elisa
黃傘 TTC卵磷脂-吐溫80-營養瓊脂流行性腹瀉病IgG抗體Elisa
弗氏檸檬酸桿 綠膿測定用假單胞瓊脂培養基（PAP）流行性腹瀉病IgA抗體Elisa
黑曲霉 甘露發酵培養基藍耳病病GP5蛋白抗體Elisa
枯草芽胞桿 十六烷基溴化銨瓊脂血管緊張IElisa
雜色曲霉 乙酰瓊脂血糖Elisa
棘托竹蓀 卵磷脂吐溫80營養瓊脂促甲狀腺Elisa
植物乳桿 SCDLP液體培養基Lys63特異性去泛化BRCC36Elisa
大腸埃希 錳鹽營養瓊脂口蹄疫VP1結構蛋白Elisa
球孢白僵 麥芽浸膏湯去泛化Elisa
膠凍樣芽胞桿 溴甲酚紫葡萄糖肉湯分泌型球蛋白MElisa
Dyella sp. 牛津瓊脂(OXA)基礎沉默調節蛋白1Elisa
葡枝根霉 萘啶酮酸(4.0mg)沉默調節蛋白2Elisa
化工儀器網