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詳細介紹
產品屬性：
中文名稱：GSK-3β抑制劑（Indirubin-3-monoxime）
英文名稱：Indirubin-3-monoxime
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
商品介紹：
Indirubin-3-monoxime是一種有效的GSK-3β抑制劑，相對較弱的5-Lipoxygenase抑制劑，IC50值分別為22nM和7.8-10μM；同時對CDK5/p25和CDK1/cyclin B也有作用，IC50值分別為100和180nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：160807-49-8 別名：Indirubin-3-oxime 純度：99.70% 分子量：277.28 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Lonsdalea quercina subsp. quercina人抗甲狀腺微粒體抗體Anti-SLC4A1AP Antibody人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)
德曼鏈霉菌小鼠25羥基維生D3Anti-SLC4A1AP Antibody人活化Ⅻ(FⅫa)
康寧木霉大鼠白介3Anti-SLC39A9 Antibody人活化Ⅻ(FⅫa)
橄欖色青霉大鼠白介5Anti-SLC52A1 Antibody人游離蛋白S(FP-S)
巴氏醋桿菌人抗甲狀腺球蛋白抗體Anti-SLC4A1AP Antibody人游離蛋白S(FP-S)
盤孢屬小鼠Ⅲ型前膠原肽Anti-SLC52A1 Antibody人異常凝血原(APT)
香菇小鼠維生CAnti-SLC52A2 Antibody人異常凝血原(APT)
泡盛曲霉人谷脫羧自身抗體Anti-SLC52A2 Antibody人循環免疫復合物(CIC)
無花果擬盤多毛孢大鼠苗條受體Anti-SLC5A2 Antibody人循環免疫復合物(CIC)
巴氏醋桿菌巴氏亞種人抗血小板抗體IgG/M/AAnti-SLC5A3 Antibody人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)
螢光假單胞桿菌小鼠Ⅱ型膠原Anti-SLC6A15 Antibody人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)
嗜鹽鹽水球形菌大鼠瘦Anti-SLC6A6 Antibody人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)
光亮小紅孔菌人抗淋巴球蛋白Anti-SLC5A6 Antibody人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)
球孢枝孢大鼠白血病抑制因子Anti-SLC6A16 Antibody人纖溶原(Plg)
死亡谷放線多孢菌小鼠維生B6Anti-SLC6A17 Antibody人纖溶原(Plg)
田頭菇大鼠L選擇Anti-SLC8A1 Antibody人性T淋巴相關抗原4(CTLA-4/CD152)
環指蛋白92抗體核盤菌M08#15
環指蛋白調節蛋白激C蛋白抗體雙色蠟蘑（不提供）M12#10
TRIM50蛋白抗體辣椒疫霉菌15A7
環指蛋白88抗體大馬勃菌LW-5F3
GSK-3β抑制劑（Indirubin-3-monoxime）棱柱散尾中華變型 乙酰丁香酮
解烴棒桿 DL-異亮
變異庫克 巖藻黃質
細鏈格孢 新魯斯可皂苷元
釀酒酵母 L-異亮
灰紅鏈霉 新苦味
中慢生華癸根瘤 香紫蘇二
阪崎腸桿 西門木炔酸乙酯
麻孢毛殼 西門木炔酸
枯草芽孢桿 維司那定
假單胞 水蘇堿
牛肝屬 十七碳酸甲酯
小鱒魚大洋芽孢桿英考丹納亞種 氫樟柳堿
百色腐霉 氫加蘭他敏
類干酪乳桿 青陽參苷元
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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