詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:MEK1/2抑制劑(AZD8330)
英文名稱:AZD8330
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
AZD8330(ARRY-424704;ARRY-704)是非ATP競爭性MEK1/2抑制劑,IC50為7nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:869357-68-6 別名:ARRY-424704;ARRY-704;AZD8330 分子量:461.23 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鮮綠青霉人乙酰化Bacillus cereus小鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)
丁梭菌人異檸檬脫氫Bacillus cereus小鼠紅生成(EPO)
釀酒酵母人原ⅡBacillus cereus小鼠紅生成(EPO)
香菇人腺苷脫Bacillus cereus小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)
鐮刀菌屬人透明質Bacillus cereus小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)
枯草芽孢桿菌人天門冬基轉移Bacillus cereus小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)
粘孢白僵菌人性磷Bacillus cereus小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)
雞白痢雞傷寒多價染色平板凝集抗原參照品人葡萄糖6磷異構Bacillus cereus小鼠Slit2
比基尼鏈霉菌人磷葡萄糖變位Bacillus cereus小鼠Slit2
黃色桿菌屬人亮酰基肽Bacillus cereus小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)
白蠟傘人鏈激Bacillus cereus小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)
靈芝人核糖核Bacillus cereus小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)
無人過氧化脂質/乳過氧化物Bacillus cereus小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)
豐加鏈霉菌人芳基硫酯ABacillus cereus小鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
嗜熱鏈球菌人對氧磷Bacillus cereus小鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
暗孢節菱孢人激Bacillus cereus小鼠降鈣原(PCT)
X射線修復交叉互補蛋白3抗體卵孢白僵菌小鼠調節性T細胞
DNA損傷修復ERCC3蛋白抗體*紫穗槐根瘤菌倉鼠卵巢細胞,(二氫葉還原缺陷)
腫瘤/睪丸抗原12家族2抗體#刺托竹蓀洲綠猴胚胎腎細胞
乙型肝炎X蛋白反轉錄蛋白4抗體#鐮刀菌人多發性骨髓瘤細胞
MEK1/2抑制劑(AZD8330)致密木霉 檸檬酸
蠟狀芽孢桿 狗牙花堿D乙
米根霉 狗牙花堿D
香菇(Cr66) 高車前
褐球固氮(未復核可換ACCC10006) 廣防風苷A
賴芽胞桿屬 喹酮
克雷伯氏 齊特
高盧蜜環 枸橘苷
淡黃木霉 苯脲
慢生根瘤 高車前苷
雅致放射毛霉 佛手柑
植物乳桿 西紅柿堿
博伊丁假絲酵母 洲防己堿
產朊假絲酵母
伊平屋橋大洋芽孢桿 知母皂苷BIII