詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:I型P21激活激酶(PAK)抑制劑(FRAX597)
英文名稱:FRAX597
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
FRAX597是一種有效的I型P21激活激酶(PAK)抑制劑,作用于PAK1,2和3,IC50分別為8,13和19nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1286739-19-2 純度:99.19% 分子量:558.1 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
杜鵑尾孢菌p19ARF抑癌基因抗體Anti-CAV3 AntibodyL解(PAL)
施氏假單胞菌p21蛋白抗體Anti-Caveolin-2/CAV2 AntibodyL-基氧化(LAO)
釀酒酵母P2Y1受體抗體/嘌呤受體抗體Anti-CAV1 Antibody(PB0107)KI-67抗原(Ki-67)
雞痘病神經再生相關蛋白抗體Anti-CBFB AntibodyJo1抗體/抗組酰tRNA合成抗體(Jo1/HRS)
食品安全快速檢測箱 精簡配置絲裂原活化蛋白激p38α抗體Anti-CBR1 AntibodyIV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)
鮑曼不動桿菌促尿鈉排泄肽前體C抗體Anti-CBL AntibodyIPO-38蛋白(IPO38)
細疣籃狀菌磷脂磷2C抗體Anti-CBS AntibodyIgγ3鏈C區(IGHG3)
粘孢白僵菌配對盒基因1抗體Anti-CBL AntibodyICOS配體(ICOSLG)
尖孢鐮孢配對盒基因2抗體Anti-Cbx8 AntibodyICE蛋白激活因子(IRAP)
可可里亞鎮小鏈孢菌p21激活激2抗體Anti-CCDC6 AntibodyI 型膠原蛋白(COL I)
火紅色紅曲菌磷酯Cβ3抗體Anti-CBS AntibodyH-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白(H-Cad/CDH13)
Marisediminicola磷化星形膠質PEA15抗體Anti-CBX3 AntibodyG蛋白偶聯受體152(GPR152/PGR5)
裂褶菌磷化星形膠質PEA15抗體Anti-CCDC36 AntibodyG蛋白偶聯受體109A(GPR109A)
短桿狀馬賽菌廣譜角蛋白PCK抗體Anti-CCKBR AntibodyG蛋白偶聯膽汁受體1(GPBAR1)
西奈青霉果膠抗體Anti-CCKBR AntibodyG蛋白偶聯雌激受體1(GPR30)
抗輻射鏈霉菌PRPF4蛋白抗體Anti-CCKBR AntibodyG蛋白偶合受體44(GPR44/CRTH2/DL1R)
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:99%,BR
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質量規格:0.99
華癸中間根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 質量規格:≥98%,BR
I型P21激活激酶(PAK)抑制劑(FRAX597)短乳桿 果蠅培養基膽固Elisa
短梗霉屬 磁細分離培養基磷脂酸Elisa
草木樨中華根瘤 鐵細培養基酪氨酸Elisa
彎曲芽孢桿* 放線培養基(改良高氏1號)胃泌Elisa
白僵 改良GAM瓊脂膽囊收縮Elisa
溜曲霉 改良GAM肉湯內皮Elisa
谷氨酸棒桿 改良麥康凱肉湯添加劑心型脂肪酸結合蛋白Elisa
尖孢鐮刀 姬姆薩染色液半胱氨酸蛋白抑制劑;胱抑CElisa
蚜蟲枝孢 莢膜染色液表皮生長因子Elisa
豇豆慢生根瘤 劉榮標氏鞭毛染色液單氧化Elisa
大腸埃希氏 芽孢染色液脂Elisa
白色類諾卡氏(可定) 乳酸酚棉藍染色液流行性腹瀉病抗體Elisa
涎沫假絲酵母 月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯-MUGCochlin蛋白Elisa
殼青霉 50%卵黃乳液酪氨酸Elisa
臘梅擬莖點霉 PBS-Tween20洗液酯Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)