化工儀器網
詳細介紹
商品介紹：
PFK-015是PFKFB3抑制劑，對重組PFKFB3的IC50為110nM，能抑制腫瘤細胞內PFKFB3活性，IC50為20nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：4382-63-2 純度：98.95% 分子量：260.29 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性：
中文名稱：PFKFB3抑制劑(PFK-015)
英文名稱：PFK-015
產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
凍干粉 志賀氏菌（陰性） 人磷甘油變位2Bacillus cereus小鼠角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)
爪哇根霉人前列腺D合成Bacillus cereus小鼠活化A(ACV-A)
黑曲霉人肽酰脯酰異構(親環蛋白)樣1Bacillus cereus小鼠活化A(ACV-A)
釀酒酵母人促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3Bacillus cereus小鼠腦源性神經營養因子(BDNF)
寄生孢人血管緊張Ⅰ轉化Bacillus cereus小鼠腦源性神經營養因子(BDNF)
釀酒酵母人抑肽Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)
球孢白僵菌人胱天蛋白12Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)
平菇2180人蛋白激ABacillus cereus小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)
香菇人解整合樣金屬蛋白10Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)
志賀氏菌人基質金屬蛋白11Bacillus cereus小鼠胰島樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)
孢囊放線菌人胸苷合成Bacillus cereus小鼠胰島樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)
寡營養單胞菌屬人胸腺嘧啶核苷磷化Bacillus cereus小鼠巨噬炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)
交織頂孢霉人多聚ADP核糖聚合Bacillus cereus小鼠巨噬炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)
匍枝根霉(黑根霉)人葡萄糖激Bacillus cereus小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)
轉化人參皂苷鞘單胞菌人單氧化Bacillus cereus小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)
旋渦混合器 (便攜式)人胞漿型磷脂A2Bacillus cereus小鼠溶菌(LZM)
Wnt蛋白家族7B抗體蘇云金芽孢桿菌阿萊亞種倉鼠腎成纖維細胞
WASF2抗體蘇云金芽孢桿菌科爾默亞種大鼠小腸隱窩上皮細胞
WNT蛋白家族Wnt8b抗體野油菜黃單胞菌核桃致綿羊睪丸上皮細胞（原代）
色豐富蛋白抗體丁香假單胞菌流洄致病變種大鼠胸大動脈平滑肌細胞
PFKFB3抑制劑(PFK-015)枯草芽孢桿 2-金剛烷酮
銹褐蠟黃鏈霉 2-金剛烷
腐霉 3'-甲氧基葛根
硬結節桿 金剛烷
枯草芽孢桿 己烯雌
高優抗(平菇) 含羞草
盤長孢狀盤孢 鄰菲啰啉
枯草芽孢桿 胡桃醌
Bacillus 間甲基紅
沙雷氏屬 灰氈毛忍冬皂苷甲
金頂側耳 海藻糖
戊糖乳桿 鉻藍黑R
弗氏鏈霉 紅鏈霉-龍膽二糖苷
門柏青霉 鉻黑T
青霉屬 決明
化工儀器網