公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：UHRF1抑制劑(NSC232003)

英文名稱(chēng)：NSC232003

產(chǎn)品規(guī)格：1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

金黃殼囊孢菌Brevibacillus laterosporus兔補(bǔ)體蛋白3(C3)

米根霉Achromobacter denitrificans兔p物質(zhì)(SP)

牛蛙假絲酵母Achromobacter denitrificans兔p物質(zhì)(SP)

圖爾正青霉Mycobacterium smegmatis兔子層連蛋白/板層(LN)

棕黑腐質(zhì)霉Lactobacillus animalis兔子層連蛋白/板層(LN)

季也蒙邁耶氏酵母Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii兔(cAMP)

固氮菌Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis兔(cAMP)

樹(shù)脂殼菌Lactobacillus murinus兔血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)

黃桿菌屬Enterococcus faecalis兔血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)

云南木霉Haloferax mediterranei兔血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)

蠟葉曲霉Halorubrum saccharovorum兔血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)

pET-39bNatrinema altunense兔骨橋(OPN)

假單胞菌屬Natrinema altunense兔骨橋(OPN)

乳桿菌屬Natrinema altunense兔子脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)

費(fèi)比恩塞伯林德納氏酵母Natrinema altunense兔子脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)

綠粘帚霉Natrinema altunense兔血清總補(bǔ)體(CH50)

甲狀腺過(guò)氧化物抗體乙酰微小桿菌(乙酰短桿菌)Prauserella rugosa

血小板生成/巨核細(xì)胞集落刺激因子抗體爭(zhēng)論貪噬菌鏈霉菌屬菌種

辣椒受體5抗體柱狀黃桿菌Actinomadura oligospora

腫瘤排斥抗原gp961變異體抗體阿姆斯特丹散囊菌Arthrobacter oryzae
UHRF1抑制劑(NSC232003)沉積物萊西氏 異檸檬酸脫氫

吉林兼性芽孢桿 纖維透析袋（5000）

山茶 漆

釀酒酵母 (+)-兒茶

假單胞屬 3-磷酸甘油酸激

鼻疽伯克霍爾德氏 纖維透析袋（5000）

吸水鏈霉紫色變種 甘油-3-磷酸脫氫

清酒假絲酵母 纖維透析袋（10000）

果生核盤(pán) 胡黃連苷III

弗雷德里克斯堡假單胞 胡黃連苷II