詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CTS-1027 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
CTS-1027是一種有效的MMP抑制劑,能夠作用于MMP2和MMP13,IC50值分別為0.3nM和0.5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:193022-04-7 別名:RS 130830;Ro 1130830;CTS1027;CTS 1027;RS130830;Ro1130830;RS-130830;Ro-1130830 純度:98.72% 分子量:425.88 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
枯草芽孢桿菌人抵抗Anti-ZNF875 Antibody小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
褐革菌人骨特異性堿性磷BAnti-ZNF76 Antibody小鼠少突膠質髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)
韋斯特迪克氏曲霉人骨鈣/骨谷蛋白Anti-ZNFN1A2 Antibody小鼠少突膠質髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)
腐爛粘束梗霉人可溶性核因子κB受體活化因子配基Anti-ZNF771 Antibody小鼠抗核抗體(ANA)
樟疫霉人1,25二羥基維生D3Anti-ZNF785 Antibody小鼠抗核抗體(ANA)
球孢白僵菌人組蛋白H2bAnti-ZP4 Antibody小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)
產短桿菌人骨保護Anti-ZRANB2 Antibody小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)
弓形蟲(RH株)人骨成型蛋白受體ⅡAnti-ZNHIT1 Antibody小鼠解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)
新城疫病人骨成型蛋白受體1AAnti-ZNRF2 Antibody小鼠解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)
長柄條孢牛肝人骨成型蛋白4Anti-ZRANB2 Antibody小鼠氧化型(GSGS)
黑曲霉人骨成型蛋白2Anti-ZSCAN26 Antibody小鼠氧化型(GSGS)
大腸埃希氏菌人Anti-ZZZ3 Antibody小鼠還原型(GSH)
香菇人甘露聚糖結合凝集相關絲蛋白Anti-ZSCAN16 Antibody小鼠還原型(GSH)
木耳屬人周期依賴性激7Anti-ZSCAN22 Antibody小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)
丁香假單胞菌人周期依賴性激2Anti-ZSCAN26 Antibody小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)
構巢曲霉人周期依賴性激1Anti-HRH2(Histamine receptor H2) Antibody小鼠c-fos
VWCE抗體福毛鬼傘(斜面)兔眼Tenon's囊成纖維細胞
Wnt1信號通路蛋白3抗體禾谷鐮孢菌(斜面)小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3)
WD重復膜蛋白61抗體雞縱菌人膽管癌細胞
EBV核蛋白2抗體巴西蘑菇正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性)
MMP抑制劑(CTS-1027)耐久腸球 魯米諾
枯草芽孢桿 焦油紫
交鏈孢 吖啶紅
膨大彎頸霉 鈣鎂試劑
樟疫霉 亮藍
大腸埃希氏桿 石炭酸復紅
布氏正青霉 隱色孔雀石綠
水生黃桿 隱色結晶紫
孟氏假單胞 赤蘚紅
腐生葡萄球 酸性偶氮紅
彩色豆馬勃
坎氏弧 7-氨基-4-甲基
豌豆根瘤 甲基藍
50876(茯苓 ) 粘蛋白胭脂紅
植物乳桿 滂天藍