小鼠骨骼肌原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段，叫做一個肌節。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞，細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方，細胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠骨骼肌細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠骨骼肌細胞經α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

DNASE1 Others Human 人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 人細胞裂解液   BHK-21(倉鼠細胞)     QGY-7701, 人肝癌細胞  中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 小鼠原代毛囊角質細胞 人原代結直腸癌相關成纖維細胞

CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase 0.5mgCYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 細胞色素P450單氧化酶(多肽抗原)

CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 標簽)

PDGFRA重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 Protein

SERPINA11 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA11 蛋白

CCL21重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein

大鼠脂素1(LPIN1)試劑盒 ，英文名： LPIN1 ELISA Kit

Mouse soluble leptin receptor (sLR) ELISA Kit 小鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒

MouseGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhumanHMGB-1ELISAKit人高遷移率族蛋白B1ELISAKit

B2高效液相色譜法定量試劑盒20次

ELISAKitGDNF大鼠膠質細胞系來源的神經營養因子

小鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)試劑盒   96T/48T

小鼠骨骼肌原代細胞小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 7 (MMP-7) ELISA Kit 大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)試劑盒

Humanmacrophagestimulatingprotein,MSPELISAKit 人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HamsterCathepsinK,cath-K試劑盒倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母細胞染色質免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒20次

MouseBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISAKit小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒規格：96T/48T

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。