詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:p38α抑制劑
英文名稱:R1487 Hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
R1487(Hydrochloride)是一個強的和高的選擇性的p38α抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:449808-64-4 別名:R-1487 Hydrochloride;R 1487 Hydrochloride 純度:98.68% 分子量:424.83 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
微球菌Rarobacter sp.兔阿霉(ADR)
威爾酵母Rarobacter sp.兔基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
枯草芽孢桿菌Microbacterium sp.兔基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
深海微小桿菌Budvicia aquatica兔抑瘤M(OSM)
香菇Rarobacter sp.兔抑瘤M(OSM)
屎腸球菌Rarobacter sp.兔血管生成2(ANG-2)
小孢根霉原變種Rarobacter sp.兔血管生成2(ANG-2)
思爾娃假絲酵母Rarobacter sp.兔血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)
斐萊氏溫揚球蟲Rarobacter sp.兔血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)
小青霉Deinococcus sp.兔可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)
香菇Aureobacterium sp.兔可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)
澳型核果褐腐病菌Sporolactobacillus sp.兔6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)
煙曲霉Paenibacillus sp.兔6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)
溜曲霉Sphaerobacter sp.兔血栓B2(TXB2)
沃氏富鹽菌Kurthia zopfii兔血栓B2(TXB2)
尖孢鐮孢Kurthia sp.兔血管內皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)
TarDNA結合蛋白43抗體泗陽鞘鞍桿菌嗜鹽鏈單孢菌
轉移生長因子β3抗體TGFβ3阿氏腸桿菌絲衣霉屬
腫瘤壞死因子受體1相關死亡域蛋白抗體球形節桿菌穗霉屬
生精細胞凋亡相關基因4抗體新型隱球酵母(新型隱球菌)天藍褐鏈霉菌
p38α抑制劑哈茨木霉 硫酸軟骨ABC
草生毛霉 硫酸軟骨AC
副球 硫酸軟骨B
釀酒酵母 神經(微生物)
黑曲霉 β-淀粉
謝瓦曲霉 酮酸氧化
腸球屬 α-淀粉(豬胰腺 )
麗瑪亞霉鮮紅變種 堿性蛋白
黑曲霉 T4 DNA聚合