化工儀器網
詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
WHI-P154 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1～3天 |
商品介紹：
WHI-P154是JAK3抑制劑，IC50為1.8μM，還能抑制EGFR，Src，Abl，VEGFR和MAPK，對JAK1和JAK2無活性。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：211555-04-3 純度：98.14% 分子量：376.2 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
青色鏈霉菌Rhizobium galegae大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)
淡紫灰吸水鏈霉菌Rhizobium galegae大鼠淋巴因子
釀酒酵母Rhizobium galegae大鼠淋巴因子
Rhizobium galegae大鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)
葡萄牙棒孢酵母Rhizobium galegae大鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)
假單胞菌屬Rhizobium galegae大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)
栗酒裂殖酵母Rhizobium galegae大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)
藤黃微球菌Rhizobium galegae大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)
乳片球菌Rhizobium galegae大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)
阿納托亞正青霉Rhizobium galegae大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)
核盤菌Rhizobium galegae大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)
平菇Rhizobium galegae大鼠Smad1
腐皮鐮孢菌Rhizobium galegae大鼠Smad1
枯草芽孢桿菌Rhizobium galegae大鼠Smad7
油鑒別試劑 Rhizobium galegae大鼠Smad7
球毛殼Rhizobium galegae大鼠26S蛋白體(26S PSM)
泛連接抗體墨西哥劍菌人體胚胎干細胞
多型性腺瘤基因樣蛋白1抗體薄皮干酪菌人神經干細胞
神經叢蛋白B2抗體黃傘視網膜Muller干細胞
血小板源性生長因子A抗體白囊耙齒菌小鼠胚胎干細胞EDJ#22（干細胞庫保藏）
JAK3抑制劑(WHI-P154)平菇(99) 種培養基
貪噬屬 瓊脂糖Ⅲ
核果鏈核盤 孟加紅培養基（虎紅培養基）
大腸埃希 玉米粉瓊脂
海南擬盤多毛孢 高鹽察氏瓊脂
腐皮鐮孢 瓊脂糖3：1HRB
枯草芽孢桿 馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）（新藥典）
松口蘑 2-烯酰氨基-2-甲基-1-磺酸
硬結節桿 小鼠分離液
芽孢桿 大鼠分離液
枯草芽孢桿 羥基纖維
黑細基格孢 腸道計數瓊脂（VRBDA）
釀酒酵母 羥基纖維
尖孢隔指孢 羥基纖維
黑烏霉 羥基纖維
化工儀器網