大鼠腸道干原代細胞

培養信息：

包被條件

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 球形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠腸道干細胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內大的微生態系統。腸道干細胞（ISC）也稱腸道上皮干細胞，主要位于腸黏膜隱窩內，其與腸道黏膜上皮的更新和修復密切相關。正常情況下，位于隱窩基底部的腸道干細胞不斷向隱窩頂部（腸腔方向）遷移，整個遷移過程大約3-5d，在遷移過程中腸道干細胞分化形成不同的腸黏膜細胞。當受到外界生理或病理信號作用時，ISC可持續增殖、分化為成熟腸上皮細胞，如腸型細胞、杯狀細胞、內分泌細胞和潘氏細胞等，從而維持腸道黏膜結構和功能的穩定性。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠腸道干細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化后，用腸道干細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠腸道干細胞經MSI-1免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液   CM-R091大鼠成骨細胞FLT3 Others Human 人 FLT3 / FLK2 / CD135 人細胞裂解液 小鼠原代腹腔主動脈外膜成纖維細胞 大鼠原代臍帶間充質干細胞

AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

CD34 Protein Rat 重組大鼠 CD34 蛋白 (Fc 標簽)

MAX重組人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠線粒體乙脫氫酶(ALDM)試劑盒 ，英文名： ALDM ELISA Kit

Pla vitamin D (VD) ELISA Kit 植物(VD)試劑盒

MouseEndostatin,ESELISAKit 小鼠內皮抑素(ES)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanAmylinELISAKit人胰淀素

細胞HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKitER大鼠雌二醇受體

小鼠血小板相關抗體IgG   英文名稱：   platelet-associated aibody IgG   規格：      英文縮寫：   PAIgG

小鼠增殖細胞核抗原   英文名稱：   Proliferating Cell Nuclear Aigen   規格：      英文縮寫：   PCNA

小鼠血小板生長因子   英文名稱：   plateler-derived growth factor   規格：      英文縮寫：   PDGF

小鼠血小板源生長因子-BB   英文名稱：   plateler-derived growth factor BB   規格：      英文縮寫：   PDGF-BB

大鼠腸道干原代細胞小鼠血管緊張素轉換酶(ACE)試劑盒 96T/48T

Rat calcium binding protein (CR) ELISA Kit 大鼠鈣結合蛋白(CR)試劑盒

Humanai-myelinaibodyIgAELISAKit 人抗髓0脂抗體IgA(ai-myelinAb)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CamelBeta-Endorphin,β-EP試劑盒β內啡肽(β-EP)試劑盒規格：96T/48T

魚類組織元素熒光定量試劑盒20次

Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit小鼠胰島素自身抗體(IAA)試劑盒規格：96T/48T

TNFRSF14重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 鈣/鈣調蛋白依賴蛋白激酶IG抗原

CYB5R1重組人 CYB5R1 蛋白 Protein

GALK1 Protein Human 重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標簽)

SIRPA Protein Rat 重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白