詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
NSC632839 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
NSC632839是一種非選擇性肽酶抑制劑,抑制USP2,USP7和SENP2,EC50分別為45±4μM,37±1μM和9.8±1.8μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:157654-67-6 純度:98.37% 分子量:339.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
裂褶菌Bacillus sp.大鼠睫狀神經營養因子(CNTF)
德爾布有孢圓酵母Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)
糖化酵母Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)
羅倫隱球酵母Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)
米氏解硫芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)
蟹味菇Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)
黃海黃色彎曲菌Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)
三方氏酵母Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)
蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)
宇佐曲霉Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)
釀酒酵母Bacillus sp.大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)
芽孢桿菌屬Bacillus sp.大鼠腦源性神經營養因子(BDNF)
平滑假絲酵母Bacillus sp.大鼠腦源性神經營養因子(BDNF)
花津灘芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠活化A(ACV-A)
棘胞木霉Bacillus sp.大鼠活化A(ACV-A)
釀酒酵母Bacillus sp.大鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)
胸腺細胞核蛋白1抗體簡單芽胞桿菌籃狀菌屬
腫瘤壞死因子受體相關因子7抗體叢毛單胞菌鐮孢屬
Toll樣受體5抗體乳微桿菌鏈孢囊菌屬
酪激A/B/C抗體罕見無色小桿菌輪絲鏈輪絲菌平陽變種
肽酶抑制劑(NSC632839)類芽孢桿 原人參二
谷棒桿Ⅰ型 擬人參皂苷RT5
釀酒酵母 人參皂苷Rf
冬克青霉 人參皂苷Rd
屎腸球 人參皂苷Re
嗜水氣單胞 人參皂苷Rc
解淀粉芽孢桿解淀粉亞種 人參皂苷Rh3
根瘤 (S型)人參皂苷Rh2
雜色曲霉 人參皂苷Rh1
蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種
黑曲霉 人參皂苷Rg2
枯草芽孢桿 人參皂苷Rg1
地中海新殼梭孢 人參皂苷Rb3
*枯草芽孢桿(編號2980的枯草復核過) 人參皂苷Rb2
米曲霉 人參皂苷Rb1