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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
AZ20 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
AZ20是一種有效的，選擇性的ATR抑制劑，IC50值為5nM；同時可抑制mTOR活性，IC50值為38nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1233339-22-4 純度：99.56% 分子量：412.51 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
柔嫩艾耳球蟲Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
薔薇枝枯病Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
根瘤菌Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
微小合軸酵母Escherichia coli大鼠胰島自身抗體(IAA)
皮奧亞類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠胰島自身抗體(IAA)
多主葡萄座腔菌Escherichia coli大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)
食用色堿性橙Ⅱ(王金黃)對照液Escherichia coli大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)
可可里亞鎮鏈孢菌Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)
果生鏈核盤菌Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)
淺黃色芽胞八疊球菌Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)
半裸法氏殼Escherichia coli大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)
腐皮鐮孢菌Escherichia coli大鼠前列腺F2α(PGF2α)
魯氏接合酵母Escherichia coli大鼠前列腺F2α(PGF2α)
桃樹葉細菌性穿孔病*Escherichia coli大鼠白三烯E4(LTE4)
普通變形桿菌Escherichia coli大鼠白三烯E4(LTE4)
多粘類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠尿激(UK)
磷脂磷水解1抗體多帶革孔菌果子貍肺成纖維樣細胞
抑癌基因p16/p14/P19抗體中國擬迷孔菌大額牛皮膚細胞
過氧化還原5/6抗體木蹄層孔菌黃牛皮膚細胞
過氧化還原1抗體大孢薄孔菌牦牛皮膚細胞
ATR抑制劑(AZ20)乳酸芽孢桿 偶氮脒類引發劑V50
麥根腐平臍蠕孢 偶氮脒類引發劑V30
雙歧雙歧桿 辛辣內酯A
曲霉屬 蒼耳亭
豬丹絲 虎掌草皂甙D
德爾布有孢酵母 鈀碳加氫催化劑
橙鱗傘 多被銀蓮花皂苷R8
鏈霉 1，3-二甲基脲
枯草芽孢桿 噻二酮苷
被孢霉屬 布魯諾廣譜高效劑
酮丁梭 噻二酮
產馬乳酒乳桿產馬乳酒亞種 液體生物防腐劑
解聚糖類芽孢桿 硫酸小檗堿
灰葡萄孢* 十烷基基
魯氏接合酵母 二氫小檗堿
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