詳細介紹
商品介紹:
SNS-062是一種有效的,非共價的BTK和ITK抑制劑,Kd值分別為0.3nM和2.2nM;對ITK的IC50值為24nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1270014-40-8 純度:98.88% 分子量:384.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
SNS-062 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
產堿假單胞菌Bacillus sp.大鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)
香菇Bacillus sp.大鼠干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)
栗疫菌Bacillus sp.大鼠干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)
馬克斯克魯維酵母Bacillus sp.大鼠煙酰腺二核苷磷(NADPH)
香蕉*Bacillus sp.大鼠煙酰腺二核苷磷(NADPH)
枯草芽孢桿菌Paenibacillus sp.大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)
釀酒酵母Paenibacillus sp.大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)
大腸埃希氏菌Paenibacillus sp.大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)
毛柄金錢菌(金針菇)Paenibacillus sp.大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)
嘴突凸臍蠕孢Paenibacillus sp.大鼠神經營養因子4(NT-4)
白僵菌Paenibacillus sp.大鼠神經營養因子4(NT-4)
枯草芽孢桿菌Paenibacillus sp.大鼠神經營養因子3(NT-3)
毛木耳Paenibacillus sp.大鼠神經營養因子3(NT-3)
紅城紅球菌Paenibacillus sp.大鼠神經生長因子(NGF)
鞘單胞菌Paenibacillus sp.大鼠神經生長因子(NGF)
節桿菌屬Bacillus cereus大鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)
促甲狀腺受體抗體N端鹽單胞菌費希新薩托菌
甲狀腺核轉錄因子-1抗體葡萄土壤桿菌福建小雙孢菌
微管蛋白抗體免疫組化用抗體Tubulinβ無色桿菌腐質霉屬
酪羥化抗體杓蘭歐文氏菌高粱葉點菌
BTK和ITK抑制劑(SNS-062)釀酒酵母 白屈菜紅堿
糞腸球 鹽酸藥根堿
澳型核果褐腐病 異土木香內酯
維羅納氣單胞 5-O-甲基維斯阿米苷
釀酒酵母 松果菊苷
澳型核果褐腐病 異類葉升麻苷
彩色豆馬勃 類葉升麻苷
綠色木霉 升麻
大腸埃希 再生纖維透析袋(8000)
秦氏蜜環 升麻苷
假單胞屬 白樺脂酸
單孢共頭霉冠囊變種 再生纖維透析袋(10000)
葡萄座腔 酸棗仁皂苷D
巴氏蘑菇(姬松茸) 酸棗仁皂苷B
淡紫紫霉 酸棗仁皂苷A