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墨累谷腦炎病毒PCR檢測試劑盒反應五要素

閱讀:130          發布時間:2021-3-24

墨累谷腦炎病毒PCR檢測試劑盒反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

小鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒
小鼠免疫球蛋白D(IgD)elisa檢測試劑盒
小鼠免疫球蛋白A(IgA)elisa檢測試劑盒
小鼠輪狀病毒(RV)抗原(Ag)elisa檢測試劑盒
小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)elisa檢測試劑盒
小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)elisa檢測試劑盒
小鼠卵泡抑素(FS)elisa檢測試劑盒
小鼠硫脂(SULF)抗體elisa檢測試劑盒
小鼠硫氧化還原蛋白(Trx)elisa檢測試劑盒
小鼠流行性乙型腦炎(JE)抗體(IgG)elisa檢測試劑盒
小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)elisa檢測試劑盒
小鼠磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)elisa檢測試劑盒
小鼠磷脂酶D2(PLD2)elisa檢測試劑盒
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸化細胞外信號調節激酶(pERK)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸化酪氨酸蛋白激酶JAK3(pJAK3)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸化表皮生長因子受體(pEGFR)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)elisa檢測試劑盒

 

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