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技術(shù)文章

轉(zhuǎn)化細(xì)胞在實驗中被污染的原因

閱讀:424          發(fā)布時間:2018-7-24

     我司生物技術(shù)指出:污染是轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。預(yù)防和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。一開始就要十分重視,防止污染,否則會前功盡棄,不僅浪費時間,而且浪費人力、物力,甚至造成無法彌補的損失。細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細(xì)胞污染。他們在細(xì)胞培養(yǎng)中污染的特點如下:

1、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細(xì)胞生長影響明顯。

2、支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很明顯,只是慢慢凋亡。

3、黑膠蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。

4、真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細(xì)胞碎片分不清,慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,也很難救活了。

5、原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細(xì)小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,轉(zhuǎn)化細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長,只有當(dāng)他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的生長,zui終形成惡性循環(huán)。

 phospho-MEK1 (Thr286) 凋亡抑制蛋白抗體

 Phospho-MEK1/2 (Ser217/221) 凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體

 Phospho-MEK1/2 (Ser221) 凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體

 phospho-MEK1/MAPKK1(Ser298) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體

 Phospho-MEK6 (Ser202) 凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體

 Phospho-MEK6 (Ser207) 凋亡相關(guān)蛋白4抗體

 Phospho-Merlin (Ser518) 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體(短型)

 Phospho-Met (Tyr1003) 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體

 Phospho-Met (Tyr1234/1235) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)
轉(zhuǎn)化細(xì)胞

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