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上海仁捷生物科技有限公司
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供應(yīng) CVNPF,神經(jīng)保護(hù)因子ELISA檢測試劑盒
| 試劑盒名稱 | 神經(jīng)保護(hù)因子ELISA檢測試劑盒 |  |
| 規(guī)格 | 48T/96T | |
| 品牌 | RENJIEBIO | |
| 檢測方法 | ELISA酶聯(lián)免疫法 | |
| 檢測波長 | 450nm | |
| 樣本 | 血清、血漿、細(xì)胞上清液等 | |
| 樣本體積 | 50~100ul | |
| 研究領(lǐng)域 | 神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、免疫學(xué)等 | |
| 使用范圍 | 僅用于科研實(shí)驗(yàn) | |
| 保存 | 2~8℃，避光保存 |
CVNPF,神經(jīng)保護(hù)因子ELISA檢測試劑盒操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
CVNPF,神經(jīng)保護(hù)因子ELISA檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算
