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骨鈣素ELISA試劑盒(種屬:小鼠)實驗檢測

2019-9-4  閱讀(929)

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骨鈣素ELISA試劑盒(種屬:小鼠)實驗檢測ELISA試劑盒特點
    一 、靈敏、特異的抗體;
  二、穩定的重復性和可靠性;
  三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
  四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
  五、節省實驗經費。


骨鈣素ELISA試劑盒(種屬:小鼠)實驗檢測ELISA試劑盒操作步驟:
1. 加標準品:在酶標包被板上設標準品孔,依次加入不同濃度的標準品50ul(建議每個濃度做2個平行孔)
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:除空白孔外每孔加入酶標試劑50μl。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。


骨鈣素ELISA試劑盒(種屬:小鼠)實驗檢測標本的采集及保存
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
4. 細 胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右 (2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組 織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


骨鈣素ELISA試劑盒(種屬:小鼠)實驗檢測應用領域:僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

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