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生物素親和素ELISA系統的檢測原理是什么?

時間:2024-1-4 閱讀:1280
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    生物素親和素(又稱抗生物素)系統(biotin avidin system,BAS)標記抗體的技術是20世紀70年代后期發展起來的一種新的免疫檢測方法。那么你知道生物素親和素ELISA系統的檢測原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!

生物素或親和素與抗體分子或標記物結合后,既不影響前者的親和力,也不改變后者的特性。親和素分子的4個活性部位并非都和連接在抗體分子上的生物素殘基結合,剩下的游離部位尚可作為另一種生物素標記蛋白質的受體。這些特點就是BAS免疫標記技術的基礎和原理。

    BAS基本檢測方法可分為兩大類,一類以游離親和素居中,分別連接生物素化大分子反應體系和標記生物素,稱為BAB法或橋聯親和素生物素法(bridged avidin biotintechnique,BRAB),其改良法稱為(avidin biotin complex,ABC)法。另一類以標記親和素連接生物素化大分子反應體系,稱為BA法或標記親和素和生物素法(LAB)。現分別介紹如下:

1. BA法亦稱LBA法。系將特異性抗體生物素化,將酶分子標記在親和素分子上,生物素化抗體與被檢抗原結合后,再借BAS的高度親和力將酶分子聯結到抗原分子上,經酶促反應即可檢出抗原。

2. BAB法亦稱BRAB法。系將特異性抗體生物素化,將酶分子標在生物素上,然后以游離親和素橋聯物,使被檢抗原、生物素化抗體和酶標生物素聯成一體。

3. ABC法原理與BAB法基本相同,只是親和素和酶標生物素需要先按一定比例形成ABC復合物,這種網絡結構結合了大量的酶分子,當親和素尚未被酶標生物素飽和時,生物素化抗體即可與之結合。

    以上便是BAS ELISA的三種基本檢測法。上述方法中,如將第二抗體生物素化,即為間接法。由于間接法增加了一級抗原抗體反應,因而比直接法更敏感,應用范圍更廣。更多有關生物素親和素ELISA系統的檢測原理是什么,請聯系北京百奧創新科技有限公司。

 


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